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synhily木虫 (正式写手)
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高手指教一下怎样使此图片清晰及酶切不完全的问题
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请教大家,怎样使得我的电泳图片变清晰。【4】Marker,从上到下的大小为200,500,800,1500,2000,3000,5000,共7条带。【3】我需要的是在309,718和614分别有三条带,309和718的两条可以看见,但是614看不清楚(我认为是614和718离得较近,导致614那条带看不清楚,也许专家认为没有酶切出614来);另外1332处那条带由于没有完全切开而存在,它的存在也不能算错。【2】564和977处有两条带,是我所希望的;1641处同样有一条没有酶切完全的带。【1】酶切的就是这个大小的DNA片段。 希望高手指教: 1,如何使得我的图片变清晰,您能具体的说下使用的软件及修改的详细过程吗? 2,导致酶切不完全的原因是什么呢? (100微升的反应体系,60微升TE溶解后,取5微升的DNA样品,酶用量从1增加到2微升,酶切时间从4个小时增加到过夜,pcr后的产物经过了2次纯化,经pcr扩增、割胶回收的产物分别用ddH20和TE缓冲液回收)这些方法我都试过了,可是,酶切还是不完全,高手不吝赐教! |
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