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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 紫外诱变后产量一直不稳定，求解决办法
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xizim

金虫 (小有名气)

[求助] 紫外诱变后产量一直不稳定，求解决办法 已有3人参与

我做的是米曲霉，经过紫外诱变后，曲酸的产量一直都不是很稳定，请问有没有什么办法让产量稳定？跪谢！！！
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1楼 2014-06-10 09:22:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

liuhedong1817

木虫 (正式写手)

hello

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+3, 鼓励应助 2014-06-14 07:56:51
xizim: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-07-10 14:55:39
产量不稳定是如何不稳定呢？是不是刚筛选出的突变菌株，刚开始产量高，传代后产量逐渐下降。如果是这种情况，应该是由于突变发生在基因组的单个染色体上，米曲霉是真核生物，染色体为双倍体，传代后，突变基因被稀释，使得到后面大多数菌体为非突变菌株，产量逐渐下降。
    解决这一问题，最好是筛选到一株高产突变株后，培养涂布，然后挑取单菌落，继续做发酵验证，筛选出不低于前一批的单菌落，然后再传代，涂布，再挑取单菌落验证，直至突变株产量稳定。
    没办法，做诱变筛选的，工作量就是大。奋斗吧，少年。
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老婆的头像
2楼2014-06-11 17:15:34
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普通回帖

xizim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuhedong1817 at 2014-06-11 17:15:34
产量不稳定是如何不稳定呢？是不是刚筛选出的突变菌株，刚开始产量高，传代后产量逐渐下降。如果是这种情况，应该是由于突变发生在基因组的单个染色体上，米曲霉是真核生物，染色体为双倍体，传代后，突变基因被稀释 ...

对，跟你说的差不多，就是第一次测产量挺高的，以后再测就低了，我去试一下你说的方法，还有关于你说的突变基因被稀释的理论有没有相关的文献推荐啊？我想看看，非常感谢！
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3楼2014-06-12 09:09:51
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w345056785

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuhedong1817 at 2014-06-11 17:15:34
产量不稳定是如何不稳定呢？是不是刚筛选出的突变菌株，刚开始产量高，传代后产量逐渐下降。如果是这种情况，应该是由于突变发生在基因组的单个染色体上，米曲霉是真核生物，染色体为双倍体，传代后，突变基因被稀释 ...

我们的枯草芽孢杆菌也有这样的问题，不知道什么原因。。。
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4楼2014-06-13 15:44:35
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主

【答案】应助回帖

这就是紫外诱变的通病。微生物修复的厉害。想办法阻止修复
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
5楼2014-06-13 17:08:09
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w345056785

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dhd997 at 2014-06-13 17:08:09
这就是紫外诱变的通病。微生物修复的厉害。想办法阻止修复

请问版主有哪些方法可以阻止修复？
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6楼2014-06-16 08:46:50
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
引用回帖:
6楼: Originally posted by w345056785 at 2014-06-16 08:46:50
请问版主有哪些方法可以阻止修复？...

一般这种全靠运气。诱变后避光试试吧
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
7楼2014-06-16 10:32:39
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w345056785

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dhd997 at 2014-06-16 10:32:39
一般这种全靠运气。诱变后避光试试吧...

是避光的...
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8楼2014-06-16 13:30:14
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liuhedong1817

木虫 (正式写手)

hello

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by xizim at 2014-06-12 09:09:51
对，跟你说的差不多，就是第一次测产量挺高的，以后再测就低了，我去试一下你说的方法，还有关于你说的突变基因被稀释的理论有没有相关的文献推荐啊？我想看看，非常感谢！...

我手头没有收集，呵呵，可以去查查英文文献，这方面应该不难查。
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老婆的头像
9楼2014-06-18 20:02:04
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liuhedong1817

木虫 (正式写手)

hello

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by w345056785 at 2014-06-13 15:44:35
我们的枯草芽孢杆菌也有这样的问题，不知道什么原因。。。...

枯草芽孢杆菌是原核生物，没有染色体，不会发生突变基因稀释现象，你们的枯草芽孢杆菌是转质粒，还是将目的基因和质粒整合到基因组呢？这个要区别对待
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10楼2014-06-18 20:04:59
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