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mfx12

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助关于gamma-Glutamyl hydrolase (GH, EC 3.4.19.9)体外催化反应的条件 已有1人参与

求助关于gamma-Glutamyl hydrolase (GH, EC 3.4.19.9)体外催化反应的条件
做实验需要用gamma-Glutamyl hydrolase将 polyglutamate methotrexate 转化为methotrexate,这个反应在红细胞内是正常反应的,查文献有方法用维生素c,还有方法用磷酸氢钠+磷酸氢二钠+巯基乙醇的,想在什么地方可查询到酶促反应的条件?维生素c是以弱还原剂,提供一个抗氧化环境?维生素C是弱酸环境,需要一个弱酸环境?
第二种方法:磷酸氢钠+磷酸氢二钠混合溶液时中性,中性环境?巯基乙醇我查询页不明白为什么用?求大仙指教~
或者有什么地方可查到该酶的反应条件?
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hyw30

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
qixingzhen: 金币+1, 多谢回帖,欢迎常来交流~ 2014-06-11 10:44:09
体外的话,我就认为你用的是游离的酶了,这就需要查询酶的性质来确定最合适反应条件,也可借鉴前人用过的方法,但最终还是得自己尝试后,确定最佳反应条件,可以说没有最好,只有更好。但一般从通用条件开始优化,缓冲溶剂配制pH 7.0左右,加维生素c或巯基乙醇是形成一个还原环境来保持酶蛋白,可能是gamma-Glutamyl hydrolase易氧化失活。
创科生物-酶催化www.novocata.com
2楼2014-06-11 09:20:14
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