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mfx12

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 113.5
帖子: 5
在线: 4.3小时
虫号: 314138
注册: 2007-02-24
专业: 自身免疫性疾病

[求助] 求助关于gamma-Glutamyl hydrolase (GH, EC 3.4.19.9)体外催化反应的条件已有1人参与

求助关于gamma-Glutamyl hydrolase (GH, EC 3.4.19.9)体外催化反应的条件
做实验需要用gamma-Glutamyl hydrolase将 polyglutamate methotrexate 转化为methotrexate，这个反应在红细胞内是正常反应的，查文献有方法用维生素c，还有方法用磷酸氢钠+磷酸氢二钠+巯基乙醇的，想在什么地方可查询到酶促反应的条件？维生素c是以弱还原剂，提供一个抗氧化环境？维生素C是弱酸环境，需要一个弱酸环境？
第二种方法：磷酸氢钠+磷酸氢二钠混合溶液时中性，中性环境？巯基乙醇我查询页不明白为什么用？求大仙指教~
或者有什么地方可查到该酶的反应条件？

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【求助】钯催化剂-如何将钯活性组分均匀牢固的负载于载体外表面已经有5人回复

1楼 2014-06-10 00:37:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hyw30

铁虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 37.8
帖子: 46
在线: 42.7小时
虫号: 71940
注册: 2005-06-02
专业: 化学生物学与生物有机化学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
qixingzhen: 金币+1, 多谢回帖，欢迎常来交流~ 2014-06-11 10:44:09

体外的话，我就认为你用的是游离的酶了，这就需要查询酶的性质来确定最合适反应条件，也可借鉴前人用过的方法，但最终还是得自己尝试后，确定最佳反应条件，可以说没有最好，只有更好。但一般从通用条件开始优化，缓冲溶剂配制pH 7.0左右，加维生素c或巯基乙醇是形成一个还原环境来保持酶蛋白，可能是gamma-Glutamyl hydrolase易氧化失活。

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