应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 溶解曲线
101/1返回列表
查看: 1853  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)

[交流] 溶解曲线 已有4人参与

哪位高手能帮我解答下以下溶解曲线情况可能出现的原因呢，跑胶的时候是单条带，到机子上就变成这样了，不过跑胶普通pcr仪上跑了34循环，在荧光定量pcr上跑了45个循环。。。求解

溶解曲线
1.jpg


溶解曲线-1
2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-06-09 00:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuxin123

禁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-09 11:18:01
本帖内容被屏蔽
2楼2014-06-09 01:08:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wuxin123 at 2014-06-09 01:08:23
图1，特异性很强，没有问题；图二感觉有引物二聚体。

谢谢回复，图二的是在目的峰后出现的峰，应该不是二聚体吧，温度八十多度了。。。。图二做了33个孔，就一个出现这种情况。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-09 09:47:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vege的桌子

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
33个孔的模板浓度都一样吗？图二是模板浓度是比较低吗？
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-09 15:57:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangy0908

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-09 18:58:05
图1的溶解曲线是正常的，非常好的溶解曲线的。图二的不好说的，即使是3个孔只出现了这个，肯定是你的模板或者引物那个地方出现了问题的。
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-09 16:01:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by vege的桌子 at 2014-06-09 15:57:00
33个孔的模板浓度都一样吗？图二是模板浓度是比较低吗？

都一样的，就是处理方式不一样而已，之前别的基因偶尔也有这种情况
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-09 17:56:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wangy0908 at 2014-06-09 16:01:02
图1的溶解曲线是正常的，非常好的溶解曲线的。图二的不好说的，即使是3个孔只出现了这个，肯定是你的模板或者引物那个地方出现了问题的。

会不会是模板的问题，之前做标准曲线的时候，只有原浓度和5倍稀释的模板出了扩增曲线，25倍以上稀释都没有扩增，这个基因的表达本来就不高。我正式做的时候，是十倍稀释的，都出了扩增，就是有一个孔出现了这个。。。
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-09 17:59:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看起来图二的小峰值跟图一的位置很像，有没有可能是加样的时候有引物污染呢
赞一下 回复此楼
8楼2014-06-10 09:38:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanlvmaomao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 炭笔橡皮 at 2014-06-10 09:38:43
看起来图二的小峰值跟图一的位置很像，有没有可能是加样的时候有引物污染呢

图二和图一不是一个基因哦，你是说图二有引物污染还是图一呢
赞一下 回复此楼
9楼2014-06-10 15:48:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

炭笔橡皮

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by lanlvmaomao at 2014-06-10 15:48:37
图二和图一不是一个基因哦，你是说图二有引物污染还是图一呢...

图二啊，图一的曲线挺好的啊
赞一下 回复此楼
10楼2014-06-11 09:04:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lanlvmaomao 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭