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420862088

新虫 (小有名气)

[求助] 关于愈创木酚法测POD酶活性的问题 已有1人参与

本人大四,在做植物生理方面的实验,采用愈创木酚法测植物中POD的酶活性,按照实验要求每隔30S测了吸光值,最后利用公式
酶活性=(吸光值变化量*提取酶液总体积)/(测定时取用的酶体积*0.01*反应时间)
现在就是不明白这个公式怎么用呀……
第一个:公式最后是吸光值的变化量除以这段反应时间,那么我们就可以测一头一尾的吸光值的变化量了,为什么还要每隔30s测一次吸光值呢?
第二个:如果是求出每30s内的酶活性,那么同样的植物材料上就可以得到多个酶活性的数值,这些数据又该如何处理呢?
实验等结果和数据分析,急用,还请指导的大神多多赐教呀……
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starseacow

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
420862088: 金币+20, 还希望大神以后多多赐教呀…… 2014-06-09 12:54:16
silicare: APEPI+1 2014-06-11 18:50:48
貌似我大四的时候也干活这个事情,真让人怀念

如果你又可以随时间记录吸光度变化的分光光度计,你可以发现在反应体系混合和反应速度基本上是呈S型曲线,而真正反映活性的是中间那段直线上升段的斜率。因此,最佳方案是测定多个时间点,取平均。你可考虑取混合后30s 60s 90s 120s测定,后者减前者得变化值,三个值平均得到结果。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2014-06-08 23:11:44
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420862088

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-08 23:11:44
貌似我大四的时候也干活这个事情,真让人怀念

如果你又可以随时间记录吸光度变化的分光光度计,你可以发现在反应体系混合和反应速度基本上是呈S型曲线,而真正反映活性的是中间那段直线上升段的斜率。因此,最佳 ...

果然有大神现身,只是我再多问一句:那个反应时间和反应速率的曲线关系是怎么来的呢?还是说分光光度计本身就可以做到呀?
3楼2014-06-08 23:47:05
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 420862088 at 2014-06-08 23:47:05
果然有大神现身,只是我再多问一句:那个反应时间和反应速率的曲线关系是怎么来的呢?还是说分光光度计本身就可以做到呀?...

我以前用的仪器自己可以做这个
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2014-06-09 00:01:36
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420862088

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-09 00:01:36
我以前用的仪器自己可以做这个...

嗯,好的,受教了,多谢啦啦……
5楼2014-06-09 12:51:15
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