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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)

[交流] 求助农杆菌转化植物检测

我把植物内源基因转入农杆菌然后再转化植物,请问在检测时 我是要提取RNA反转录后的CDNA作模板进行PCR检测还是可以直接提取DNA作模板直接检测?还有检测方法除了抗生素筛选和 PCR外还有什么方法?
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reasonspare

木虫 (著名写手)

最好一步到位,
northern
或者

realtime

别的都是Postive
你还得做这一步/
大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
3楼2008-03-23 02:55:59
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jerome711

银虫 (小有名气)

抗生素筛选就很方便的阿。
做懂得生活的人
2楼2008-03-22 21:44:47
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xiaoli8609

银虫 (小有名气)

northern我们这里没条件,realtime做起来比较麻烦,而且成本较高。所以我想是不是PCR检测目的基因会好一些?那么用植物提出的DNA可以直接作模板还是要RNA反转录才可以?谢谢哦!
4楼2008-03-23 17:43:31
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liudeng821111

木虫 (正式写手)

请教楼主

reasonspare(金币+0,VIP+0):最好,说详细,然后重新开帖, 很少人会翻倒最后看问题.
我也是用农杆菌转化植物(苜蓿),不过还没做到楼主这一步,正在进行转化中,将近半年还没成功,想请楼主赐教以下两个问题:1.您用农杆菌浸染的是外植体还是愈伤组织?浸染时间是多少?2.促进愈伤组织生芽的激素是什么,比例是多少?
      谢谢!预祝楼主实验成功!
5楼2008-03-23 18:30:52
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