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shellyxss

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 13:03:40
点样空那最亮的不是DNA,那是蛋白。
你基因组根本就没提好,从4泳道看,基因组降解得厉害。
所以123酶切没意思。

DNA为什么会降解啊?
还有为什么最亮的是蛋白啊。。。
Always be curious about nature
11楼2014-06-08 14:24:52
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hailunl

金虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by shellyxss at 2014-06-08 14:24:52
DNA为什么会降解啊?
还有为什么最亮的是蛋白啊。。。...

你苯酚,氯仿抽提时候,没做好,估计吸上清时候吸到中间层了,中间层是蛋白。你可以多抽提一次。
蛋白为什么会降解?
这个涉及到很多问题,我是做植物的,造成降解原因一般为:1、磨样时候,样完全解冻了,裂解液还没加;DNA 酶Ⅰ活性恢复,造成降解;2、配置裂解液的tris等没调PH,或者PH没调对,造成DNA提不出来或者降解,如果用试剂盒那就不是这个原因了;3、回收操作细节造成降解,TE有问题,不过dd水溶解就可以了,特别对于酶切,这很重要。
不知道你懂了没有,现在一知半解人真多,都网上瞎指导。
多看看朱玉贤和郑用琏的分子生物学,最基础的很重要。
12楼2014-06-08 18:49:52
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hailunl

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-08 11:52:09
貌似细菌基因组都没提好哦,至少让我见到那条带啊,RNA也不除干净,酶切后没法判断的

RNA很严重吗?不懂就莫网上误导别人。
RNA没除干净,酶切后无法判断?笑了。
不要误人。
13楼2014-06-08 18:54:57
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hailunl

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jmmchen at 2014-06-08 12:47:20
为什么要酶切基因组DNA呢,有什么意义吗

有可能做southern。
14楼2014-06-08 18:55:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 18:54:57
RNA很严重吗?不懂就莫网上误导别人。
RNA没除干净,酶切后无法判断?笑了。
不要误人。...

你是做实验的吗?对照里连基因组那条带都没有,做酶切,RNA不除干净,你怎么分辨DNA与RNA,外行就别在这瞎搅和

[ 发自小木虫客户端 ]
15楼2014-06-08 19:31:21
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hailunl

金虫 (正式写手)

引用回帖:
15楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-08 19:31:21
你是做实验的吗?对照里连基因组那条带都没有,做酶切,RNA不除干净,你怎么分辨DNA与RNA,外行就别在这瞎搅和
...

自己没学好,莫瞎指导师弟师妹,你知道RNA多大吗?你知道基因组酶切条带是怎样的吗,那是弥散的和RNA不相干。你就是小木虫的学术骗子,连学术都算不上。。你不要再瞎指导了。懒得和你讲,讲你也不懂。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
16楼2014-06-08 23:59:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 23:59:23
自己没学好,莫瞎指导师弟师妹,你知道RNA多大吗?你知道基因组酶切条带是怎样的吗,那是弥散的和RNA不相干。你就是小木虫的学术骗子,连学术都算不上。。你不要再瞎指导了。懒得和你讲,讲你也不懂。
...

和你这种外行没什么好讲的,2B一个,有多远滚多远,你恐怕要从幼儿园开始复习吧。

[ 发自小木虫客户端 ]
17楼2014-06-09 00:11:03
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a50044758

银虫 (小有名气)

基因组没提好,好的基因组看起来是一条大于15000bp的一坨,而且你没有除RNA
18楼2014-06-10 13:47:26
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a50044758

银虫 (小有名气)

这个是提好的基因组和用HIND111切后的图。做酶切的筒子们进来看看吧
19楼2014-06-10 13:51:45
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shellyxss

金虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by a50044758 at 2014-06-10 13:51:45
这个是提好的基因组和用HIND111切后的图。

太感谢啦!
Always be curious about nature
20楼2014-06-11 12:35:07
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