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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 做酶切的筒子们进来看看吧
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shellyxss

金虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 13:03:40
点样空那最亮的不是DNA，那是蛋白。
你基因组根本就没提好，从4泳道看，基因组降解得厉害。
所以123酶切没意思。

DNA为什么会降解啊？
还有为什么最亮的是蛋白啊。。。
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11楼2014-06-08 14:24:52
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hailunl

金虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by shellyxss at 2014-06-08 14:24:52
DNA为什么会降解啊？
还有为什么最亮的是蛋白啊。。。...

你苯酚，氯仿抽提时候，没做好，估计吸上清时候吸到中间层了，中间层是蛋白。你可以多抽提一次。
蛋白为什么会降解？
这个涉及到很多问题，我是做植物的，造成降解原因一般为：1、磨样时候，样完全解冻了，裂解液还没加；DNA 酶Ⅰ活性恢复，造成降解；2、配置裂解液的tris等没调PH，或者PH没调对，造成DNA提不出来或者降解，如果用试剂盒那就不是这个原因了；3、回收操作细节造成降解，TE有问题，不过dd水溶解就可以了，特别对于酶切，这很重要。
不知道你懂了没有，现在一知半解人真多，都网上瞎指导。
多看看朱玉贤和郑用琏的分子生物学，最基础的很重要。
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12楼2014-06-08 18:49:52
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hailunl

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-08 11:52:09
貌似细菌基因组都没提好哦，至少让我见到那条带啊，RNA也不除干净，酶切后没法判断的

RNA很严重吗？不懂就莫网上误导别人。
RNA没除干净，酶切后无法判断？笑了。
不要误人。
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13楼2014-06-08 18:54:57
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hailunl

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jmmchen at 2014-06-08 12:47:20
为什么要酶切基因组DNA呢，有什么意义吗

有可能做southern。
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14楼2014-06-08 18:55:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 18:54:57
RNA很严重吗？不懂就莫网上误导别人。
RNA没除干净，酶切后无法判断？笑了。
不要误人。...

你是做实验的吗？对照里连基因组那条带都没有，做酶切，RNA不除干净，你怎么分辨DNA与RNA，外行就别在这瞎搅和

[ 发自小木虫客户端 ]
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15楼2014-06-08 19:31:21
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hailunl

金虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-06-08 19:31:21
你是做实验的吗？对照里连基因组那条带都没有，做酶切，RNA不除干净，你怎么分辨DNA与RNA，外行就别在这瞎搅和
...

自己没学好，莫瞎指导师弟师妹，你知道RNA多大吗？你知道基因组酶切条带是怎样的吗，那是弥散的和RNA不相干。你就是小木虫的学术骗子，连学术都算不上。。你不要再瞎指导了。懒得和你讲，讲你也不懂。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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16楼2014-06-08 23:59:23
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Neo2000

木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by hailunl at 2014-06-08 23:59:23
自己没学好，莫瞎指导师弟师妹，你知道RNA多大吗？你知道基因组酶切条带是怎样的吗，那是弥散的和RNA不相干。你就是小木虫的学术骗子，连学术都算不上。。你不要再瞎指导了。懒得和你讲，讲你也不懂。
...

和你这种外行没什么好讲的，2B一个，有多远滚多远，你恐怕要从幼儿园开始复习吧。

[ 发自小木虫客户端 ]
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17楼2014-06-09 00:11:03
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a50044758

银虫 (小有名气)
基因组没提好，好的基因组看起来是一条大于15000bp的一坨，而且你没有除RNA
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18楼2014-06-10 13:47:26
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a50044758

银虫 (小有名气)
这个是提好的基因组和用HIND111切后的图。做酶切的筒子们进来看看吧
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19楼2014-06-10 13:51:45
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shellyxss

金虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by a50044758 at 2014-06-10 13:51:45
这个是提好的基因组和用HIND111切后的图。

太感谢啦！
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20楼2014-06-11 12:35:07
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