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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » GCbuffer
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berry94

铁虫 (初入文坛)

[求助] GCbuffer 已有1人参与

辛苦的生物学者们有没有遇到这样滴情况呀？克隆的基因GC含量达到70%，然而用GCbuffer和ETaq酶时不出条带，用了ETaqbuffer和ETaq酶时反而有条带，好像还不是单引物出的条带，因为我提高温度后条带更亮了，我觉着好奇怪啊。哥哥姐姐们帮忙分析下呗
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实验快快出结果
1楼 2014-06-07 18:52:07
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liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-06-07 19:13:12
测序了吗？如果序列对了就不用再纠结这个问题了，GC buffer还是ETaqbuffer，能扩出来就是好buffer
如果序列不对，建议加GC buffer的同时加DMSO降低退火温度试试，70%有点高了
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2楼2014-06-07 18:56:08
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berry94

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liug268 at 2014-06-07 18:56:08
测序了吗？如果序列对了就不用再纠结这个问题了，GC buffer还是ETaqbuffer，能扩出来就是好buffer
如果序列不对，建议加GC buffer的同时加DMSO降低退火温度试试，70%有点高了

还没，准备再检测下测序，好怕序列不对，克隆这个基因好久了，好不容易出来大小靠谱的条带了
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实验快快出结果
3楼2014-06-07 18:59:57
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