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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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berry94

铁虫 (初入文坛)

[求助] GCbuffer 已有1人参与

辛苦的生物学者们有没有遇到这样滴情况呀?克隆的基因GC含量达到70%,然而用GCbuffer和ETaq酶时不出条带,用了ETaqbuffer和ETaq酶时反而有条带,好像还不是单引物出的条带,因为我提高温度后条带更亮了,我觉着好奇怪啊。哥哥姐姐们帮忙分析下呗
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实验快快出结果
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liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流! 2014-06-07 19:13:12
测序了吗?如果序列对了就不用再纠结这个问题了,GC buffer还是ETaqbuffer,能扩出来就是好buffer
如果序列不对,建议加GC buffer的同时加DMSO降低退火温度试试,70%有点高了
2楼2014-06-07 18:56:08
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berry94

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liug268 at 2014-06-07 18:56:08
测序了吗?如果序列对了就不用再纠结这个问题了,GC buffer还是ETaqbuffer,能扩出来就是好buffer
如果序列不对,建议加GC buffer的同时加DMSO降低退火温度试试,70%有点高了

还没,准备再检测下测序,好怕序列不对,克隆这个基因好久了,好不容易出来大小靠谱的条带了
实验快快出结果
3楼2014-06-07 18:59:57
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