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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 求抗体浓度测定方法
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

[求助] 求抗体浓度测定方法 已有5人参与

测抗体浓度，用了三种方法，差别好大，第一种是在抗体用pbs 透析后用BSA 做标曲测，第二种是抗体冻干成干粉后取一定量溶解后用BSA 做标曲测和，最后是抗体冻干成干粉后取一定量溶解后用紫外分光光度计测，本想看一下这三种方法测得结果是否一样，结果差距都太大，求各位大神指点啊！
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1楼 2014-06-06 09:46:48
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by niyinluo at 2015-03-21 13:13:04
就是梯度稀释不太懂啊~~~不知道大概稀释多少呢？你一般都稀释多少的啊？1000+？...

不同的抗体用的稀释度不同，我以前制的单抗稀释1000倍用，浓度约是1ug/mL。具体用量根据抗体的效价，低的话可以从100倍开始，2倍的梯度，8个梯度就到了12800。看看哪个稀释度的吸光值在1.0。

[ 发自小木虫客户端 ]
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17楼2015-03-21 17:43:15
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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千寻@德院: 金币+2 2014-06-06 12:25:06
我测抗体浓度用的第一种。你做的什么实验需要准确测定抗体浓度？我们只需知道大概的浓度，后面都以稀释倍数来表示抗体的工作浓度。
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2楼2014-06-06 10:56:03
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匿名

用户注销 (著名写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
千寻@德院: 金币+2 2014-06-06 12:25:14
本帖仅楼主可见
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3楼2014-06-06 11:02:22
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-06 10:56:03
我测抗体浓度用的第一种。你做的什么实验需要准确测定抗体浓度？我们只需知道大概的浓度，后面都以稀释倍数来表示抗体的工作浓度。

我是要稀释抗体做elisa，用来检测某种物质的成分，可是我冻干前后测得浓度差距一半，所以有点愁人
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4楼2014-06-06 12:24:06
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