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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 求抗体浓度测定方法
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)

[求助] 求抗体浓度测定方法 已有5人参与

测抗体浓度，用了三种方法，差别好大，第一种是在抗体用pbs 透析后用BSA 做标曲测，第二种是抗体冻干成干粉后取一定量溶解后用BSA 做标曲测和，最后是抗体冻干成干粉后取一定量溶解后用紫外分光光度计测，本想看一下这三种方法测得结果是否一样，结果差距都太大，求各位大神指点啊！
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1楼 2014-06-06 09:46:48
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by louis_cheung at 2014-06-07 15:47:13
可用：E=((5500×Nw) + (1490×NY) + (125×NC))/W

公式1 蛋白质消光系数计算公式 E：消光系数，单位(mg/ml)-1cm-1；W：蛋白质分子量，单位g/mol N：蛋白质序列中某种氨基酸个数；w：色氨酸；Y：酪氨酸；C：胱氨 ...

额，我不知道我的抗体的这些数据。。。。。非常感谢
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12楼2014-06-09 12:05:59
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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千寻@德院: 金币+2 2014-06-06 12:25:06
我测抗体浓度用的第一种。你做的什么实验需要准确测定抗体浓度？我们只需知道大概的浓度，后面都以稀释倍数来表示抗体的工作浓度。
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2楼2014-06-06 10:56:03
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匿名

用户注销 (著名写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
千寻@德院: 金币+2 2014-06-06 12:25:14
本帖仅楼主可见
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3楼2014-06-06 11:02:22
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千寻@德院

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-06 10:56:03
我测抗体浓度用的第一种。你做的什么实验需要准确测定抗体浓度？我们只需知道大概的浓度，后面都以稀释倍数来表示抗体的工作浓度。

我是要稀释抗体做elisa，用来检测某种物质的成分，可是我冻干前后测得浓度差距一半，所以有点愁人
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4楼2014-06-06 12:24:06
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查看全部 19 个回答
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