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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白纯化时用的HFPES缓冲液配制问题
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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白纯化时用的HFPES缓冲液配制问题 已有2人参与

有没有人在蛋白纯化时用过关于HEPES缓冲液，（1L）
                    25mM   HEPES—KOH , pH7.9   
                    10mM   NaCl
                    10mM   Na2S2O5
                     5mM   MgCl2
                     7mM  β-巯基乙醇
                      1mM  PMSF
0.1%(V/V)   Trasylol（抑肽酶）
应该怎么配制？是先配合适浓度的HEPES—KOH , pH7.9，再加其他的物质？   还是所有的物质一块加，再用KOH调ph?
希望哪位大侠给指导一下，谢谢！！！
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1楼 2014-06-05 16:47:57
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lpzl

木虫 (正式写手)
学习下。。。
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-06-05 18:06:55
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bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
1066479423: 金币+2 2014-07-07 16:00:35
先各自配母液，有些母液要调pH；再根据需要的终浓度混合，再调pH、电导。
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3楼2014-06-06 13:25:26
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1066479423

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bioleo at 2014-06-06 13:25:26
先各自配母液，有些母液要调pH；再根据需要的终浓度混合，再调pH、电导。

您意思是每个溶液都单独配吗？不能一块混合吗？谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-08 10:03:10
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kos900907

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-07 15:25:26
1066479423: 金币+3 2014-07-07 16:00:30
应该是先不加koh，所有的试剂都称好了溶解后用koh调ph。
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生物制药
5楼2014-06-19 21:35:28
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1066479423

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kos900907 at 2014-06-19 21:35:28
应该是先不加koh，所有的试剂都称好了溶解后用koh调ph。

你们有用过这个缓冲液吗？我也是这么认为的，但就是不确定这样对不对
赞一下 回复此楼
6楼2014-06-25 20:16:24
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kos900907

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 1066479423 at 2014-06-25 20:16:24
你们有用过这个缓冲液吗？我也是这么认为的，但就是不确定这样对不对...

我有同事着做这个。都是这样配。
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生物制药
7楼2014-06-25 22:55:15
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1066479423

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by kos900907 at 2014-06-25 22:55:15
我有同事着做这个。都是这样配。...

恩，好的，谢谢
回复此楼
8楼2014-07-07 10:57:26
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