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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » [求助]有关荧光光谱滤光片的基本问题
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hikozl

[交流] [求助]有关荧光光谱滤光片的基本问题

　　　如果我拿样品去测激发谱和发射谱时，不加滤光片时，激发谱上３１０nm左右有很强的峰，然后测试发射谱时，在６２０nm有很强的峰，这个效应究竟是怎么回事呢？还有就是滤光片究竟应该怎么选择？

[ Last edited by dnp on 2008-3-21 at 11:21 ]
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1楼 2008-03-21 11:04:15
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hero_gjz

金虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):谢谢应助……^_^
这个是光栅的倍频效应导致的。
也就是说，你光栅分出来的激发光310nm，必定会伴随620，930nm这样的光出来，所以就会检测到620nm的峰。

根据这个原理，在激发窗口选择合适的滤光片，过滤掉倍频光。
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2楼2008-03-21 12:25:58
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prime2003

银虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):thanks ^_^
楼上说的不错，应该是单色器的二级光谱

在选择荧光滤光片时应考虑样品的情况，包括浓度、波长和荧光光谱特性等等。你这种情况，如果荧光峰在400-500nm间，一般使用一块500nm左右短波通截止滤光片就可以了。如果浓度极低且荧光峰靠近激发光波长可能还需要在短波截止，那就要用一定带宽的带通滤光片了。
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3楼2008-03-21 13:47:21
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hikozl

还是有点不懂,如果荧光峰在400-500nm间，一般使用一块500nm左右短波通截止滤光片就可以了
这个500nm的滤光片是阻隔掉500nm以下的光还是以上的光?如果是阻隔掉比500nm低的光,那荧光峰在400-500nm不就被挡住了?那还怎么看荧光??
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4楼2008-03-23 09:40:04
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prime2003

银虫 (小有名气)
短波通是指短波长通过，长波截止
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5楼2008-03-24 21:19:26
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hikozl

那这个310nm是机器本身带有的吗?是不是我拿任何样品去都会有310nm这个峰?然后我用500nm的滤波片,就可以截住会在620nm出来的光而让400-500nm左右的荧光峰通过,对吧?但我测的是Eu相关的东西,发红光,如果把500nm以上的截掉了,那Eu的特征荧光不是都出不来?
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6楼2008-04-04 16:40:05
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hikozl

这么说吧,我做的是Eu和有机物的配合物,激发谱是有机物在320左右有吸收,然后Eu在350-420nm左右有吸收.
然后出来的荧光都是Eu发的特征光谱,红光,590,620,650,690一共有四个特征峰.

那么,我应该怎样选择滤光片呢?理由是?
谢谢大家
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7楼2008-04-04 16:46:02
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prime2003

银虫 (小有名气)
★
dnp(金币+1,VIP+0):thanks ^_^
激发峰可否在290和350以外，这样就可以让开二级谱
   如果不行，就要确定样品的量子产率和浓度，如果是强荧光高浓度，可以试试把激发和发射单色器带宽调到最低，应该是2nm，再把激发波长放在302或317（激发的二级谱不要在发射峰上），这样二级谱会低些，扣掉背景后影响不会很大。
   还不行，就花点钱买一块好点的干涉滤片隔一下。
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8楼2008-04-07 09:22:43
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