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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » ELISA结果分析
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中庸001

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 寂静之林 at 2014-06-06 12:58:35
标记HRP，底物不是TMB+过氧化物，如果是这个底物的话，单波长检测应该是450，双波长是450+630的，为什么你的会是492的？
感觉你的实验设计本身就有点问题。整个实验，根据你的实验操作和我过往的经验，我认为是摸索 ...

我用的底物是邻苯二胺 测定波长为492，又完全相同的重复了一次全过程，得到的结果对比很明显，是理想的结果。因此就更想弄清楚这次是什么原因造成的了ps:理想结果使用的试剂依旧是这次试验的。实验就是摸索合适的抗原浓度。
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11楼2014-06-07 11:09:20
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寂静之林

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 中庸001 at 2014-06-07 11:09:20
我用的底物是邻苯二胺 测定波长为492，又完全相同的重复了一次全过程，得到的结果对比很明显，是理想的结果。因此就更想弄清楚这次是什么原因造成的了ps:理想结果使用的试剂依旧是这次试验的。实验就是摸索合适的抗 ...

想要弄清实验失败的原因，那就要你自己去对比分析了。
成功实验和失败实验使用的试剂，完全一样（指同时配制）的话，那就可能是在实验某一步操作中出现了问题，这就要你自己查看实验记录或仔细回忆两次实验之间的操作有什么不一样的了。如果试剂不是同时配制的话，就更加要注意试剂有没有配制错误了。
失败和成功的实验，整个过程中，肯定会有一点差异的东西，那一点差异就导致了你之前的实验失败。
最后，如果这样还不能找到实验失败的原因的话，那就记录成功实验的每个步骤，保证以后的实验都是成功的，并详细做好实验记录，方便自己对实验结果进行分析，并避免因为同样的原因而导致实验失败！
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12楼2014-06-07 18:52:18
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laohuwang14

新虫 (初入文坛)
作ELISA， 信号（OD）值一般要求大于0.5，减去背景（Background）一般要大于0。3， 这样的结果才有意义。你的结果OD大多是负值，或0.0X，这结果不说明任何事情。看来你的ELISA不Working。 原因可能：包被抗体不识别你的抗原，或抗原浓度太低，或检测抗体不Working。 作ELISA， 事先应用阳性样本（或从第三方出售的样本）建立起Working条件，再用你的样本来检测。
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13楼2014-06-08 14:24:43
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青麟deira

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 寂静之林 at 2014-06-06 12:58:35
标记HRP，底物不是TMB+过氧化物，如果是这个底物的话，单波长检测应该是450，双波长是450+630的，为什么你的会是492的？
感觉你的实验设计本身就有点问题。整个实验，根据你的实验操作和我过往的经验，我认为是摸索 ...

因为工作需要，求推荐elisa相关的书籍，以便了解，谢谢！
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14楼2014-08-25 14:59:57
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