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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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qdvod

[交流] RNA逆转录求助

我提取的细胞总RNA稀释50倍后测定OD值,OD260/OD280比值为1.751,计算浓度用1ug为模板进行逆转录,引物是随机引物六聚体(0.25µg/µl)1ul,同时做了试剂盒里面的阳性对照。结果对照逆转的很漂亮,提取的RNA却什麽也没逆转出来。已经重复了多次,都是这样的结果,请教各位高手问题出在哪里?是不是提取的RNA不够纯,量太少?我是用微量RNA提取试剂盒提取的。
谢谢!不胜感激!!
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cosmosmid

新虫 (小有名气)

the problem is your primer

you may use the OligodT as your primer, then, you must design your primer based on the length of your cDNA
4楼2008-03-21 16:14:29
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weiwei1

木虫 (小有名气)

RNA应该测OD230吧
2楼2008-03-21 09:25:00
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傻子

木虫 (正式写手)

可能问题出在提的RNA不够纯,OD上看有点偏低了。一般反转录不需要很大量的,有一次我提的RNA电泳基本没见条带,但是照样能转出来。
1984年中国制造,长173CM,净重64kg,采用人工智能,国家免检优质产品。
3楼2008-03-21 12:26:56
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