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分子结构

金虫 (小有名气)

[求助] 急急急,无奈无助~~~我的Marker怎么了~~~ 已有5人参与

最近快被Marker整疯了,跑SDS-PAGE,Marker中总有杂带,详情见附件,这些杂带弄得我都不知道真正的Marker条带了,找了各种原因,加热,加DTT,分离胶浓度,各种有问题的地方都试过了,我的发酵液样品跑的很好,可使Marker却让我如此难堪!
     备注:之前的Marker也是这样,怀疑被污染了,近两天刚买的新的,还是这样有杂带!直接疯了!Marker是Fermentas 的26610系列,估计很多实验室都用过,分子量14.4-18.4-25-35-45-66.2-116。图中左侧4条都是这种Marker。
                                                    急求各位专家意见!!小女子在此拜谢!

急急急,无奈无助~~~我的Marker怎么了~~~
IMG_20140603_074711.jpg
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永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的,只是春天的一朵花,整个春天还是你的。
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uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2014-06-03 13:09:26
发酵液样品跑的很好,说明可以排除试剂以及器具的污染,只能说还是marker本身的问题。不过,你的marker按你所说应该是7个条带,看图也差不多就是7个条带吧,你再增加marker的上样量,一起跑胶做个对比,确定一下哪些条带是marker。
    另外,你所说的杂带是指最后面的那些吗?是不是你上样的时候样品没能完全进入槽内
2楼2014-06-03 10:17:25
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你跑的时间不够啊, marker 有7个带 你这里只分离出6个。 而且你说哪个是杂带?
3楼2014-06-03 10:23:44
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
找个不用自己加考马思亮蓝的做个对照,会不会是这个原因

[ 发自小木虫客户端 ]
我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
4楼2014-06-03 19:13:38
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如果可以123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
和我用的一样,我告诉你方法吧,取出20微升marker,然后加入20微升5上样缓冲液,100摄氏度煮5分钟,10微升上样,你试试吧,我和你用的型号一样,可以的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-06-03 19:31:54
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如果可以123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有,貌似你跑的胶时间长了点啊

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-06-03 19:33:07
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

O(∩_∩)O加油~。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
7楼2014-06-06 23:48:54
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zhangzefeng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

把电泳缓冲液换了,重新配

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-06-07 00:28:23
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