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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 急急急，无奈无助~~~我的Marker怎么了~~~
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分子结构

金虫 (小有名气)

[求助] 急急急，无奈无助~~~我的Marker怎么了~~~ 已有5人参与

最近快被Marker整疯了，跑SDS-PAGE，Marker中总有杂带，详情见附件，这些杂带弄得我都不知道真正的Marker条带了，找了各种原因，加热，加DTT，分离胶浓度，各种有问题的地方都试过了，我的发酵液样品跑的很好，可使Marker却让我如此难堪！
     备注：之前的Marker也是这样，怀疑被污染了，近两天刚买的新的，还是这样有杂带！直接疯了！Marker是Fermentas 的26610系列，估计很多实验室都用过，分子量14.4-18.4-25-35-45-66.2-116。图中左侧4条都是这种Marker。
                                                    急求各位专家意见！！小女子在此拜谢！

急急急，无奈无助~~~我的Marker怎么了~~~
IMG_20140603_074711.jpg
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永远不要为失去的感到遗憾——你没有摘到的，只是春天的一朵花，整个春天还是你的。
1楼 2014-06-03 08:08:24
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uranuser

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2014-06-03 13:09:26
发酵液样品跑的很好,说明可以排除试剂以及器具的污染，只能说还是marker本身的问题。不过，你的marker按你所说应该是7个条带，看图也差不多就是7个条带吧，你再增加marker的上样量，一起跑胶做个对比，确定一下哪些条带是marker。
    另外，你所说的杂带是指最后面的那些吗？是不是你上样的时候样品没能完全进入槽内
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2楼2014-06-03 10:17:25
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你跑的时间不够啊， marker 有7个带 你这里只分离出6个。 而且你说哪个是杂带？
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3楼2014-06-03 10:23:44
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
找个不用自己加考马思亮蓝的做个对照，会不会是这个原因

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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
4楼2014-06-03 19:13:38
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如果可以123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
和我用的一样，我告诉你方法吧，取出20微升marker，然后加入20微升5上样缓冲液，100摄氏度煮5分钟，10微升上样，你试试吧，我和你用的型号一样，可以的

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5楼2014-06-03 19:31:54
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如果可以123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

还有，貌似你跑的胶时间长了点啊

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6楼2014-06-03 19:33:07
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者
O(∩_∩)O加油~。
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曾经有人问我为什么要学微生物，我只是想离生命的本质更近一点。
7楼2014-06-06 23:48:54
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zhangzefeng

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

把电泳缓冲液换了，重新配

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8楼2014-06-07 00:28:23
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