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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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沧海蝴蝶

[交流] 基因组DNA的部分酶切

我现在准备用sau3A1部分酶切细菌的基因组DNA,对部分酶切的反应时间、加入酶的量以及样品DNA的质量浓度不知道怎么确定,它们对酶切效果的影响是怎样的,还有买回的酶里带的缓冲液用时需不需要再稀释?想听听大家的宝贵经验,会对我的实验有很大的帮助。先谢谢了!
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nnfyw

木虫 (著名写手)

买个机械打断基因组DNA的试剂盒哪里有的卖啊,多少钱啊
5楼2008-03-19 23:26:17
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biocore


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
部分酶切就似乎,在完全酶切的基础上,酶用量减少,酶切时间减少。
至于具体减少多少,达到你的实验效果,要自己摸条件。
2楼2008-03-19 22:21:47
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qianxibanli

铜虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 关注,.
做几个平行,酶量一样,不同的切割时间梯度,进行酶切,最后电泳看一看你所要求的片断范围那个更复合。
3楼2008-03-19 22:29:59
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elton_monkey

银虫 (初入文坛)


reasonspare(金币+1,VIP+0):thx,如果有详细的介绍就好了
部分酶切必须要摸条件,一般会做一个酶浓度和酶切时间两个变量。不过看你估计是要建DNA文库,其实可以买个机械打断基因组DNA的试剂盒,效果还不错,比用部分酶切花时间少多了。
4楼2008-03-19 22:54:19
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