| 查看: 9212 | 回复: 82 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
细胞冻存有遇到过这些问题吗？
|
|||
|
很多珍贵的细胞株，冻存后很难复苏，或者复苏后出现大量死亡，不知大家都是怎么处理的，是否解决了这些问题？ 我先说说我最近遇到的问题吧。 培养物：杂交瘤细胞 冻存液：90%FBS+10%DMSO 冻存过程：(泡沫盒) -70℃过夜→转液氮保存 复苏过程：40℃水浴→90s内，溶解→1500 rpm，3 min→弃上清，培养基重悬→T75培养瓶培养，5% CO2,37℃，DMEM+20%FBS+双抗 问题：部分细胞复苏之后，大量死亡，有的甚至全部死亡；此类细胞中，部分细胞复苏起来后死的就很多，部分细胞过几个小时后死亡 作出的努力：1、在添加饲养细胞的24孔板内复苏，能抢救一部分，但耗时 2、冻存数目增加，占的位置太多，且仍然不能解决 3、试过不同的冻存液配方，FBS20%、50%、90%都没有明显的改善 最近一次发现，-70保存后复苏比液氮保存后复苏的效果要好很多，这说明我在转液氮的时候出问题了么？可是不是很明白会出啥问题呢~~ 请大家都来说一说哈！ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
Gary张» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有62人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有10人回复
-
filecode
已经有12人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有7人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有13人回复
-
各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。
已经有8人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有22人回复
你的样子。
铜虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 205.1
- 帖子: 20
- 在线: 4.5小时
- 虫号: 4124088
- 注册: 2015-10-07
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
83楼2016-04-27 14:58:47
chentao
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 85844.2
- 红花: 7
- 帖子: 64099
- 在线: 985.3小时
- 虫号: 203675
- 注册: 2006-03-02
- 专业: 催化化学
2楼2014-05-28 15:52:04
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
， [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2014-05-28 15:53:00
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
 |
6楼2014-05-28 16:02:39
