| 查看: 7445 | 回复: 82 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
细胞冻存有遇到过这些问题吗？
|
|||
|
很多珍贵的细胞株，冻存后很难复苏，或者复苏后出现大量死亡，不知大家都是怎么处理的，是否解决了这些问题？ 我先说说我最近遇到的问题吧。 培养物：杂交瘤细胞 冻存液：90%FBS+10%DMSO 冻存过程：(泡沫盒) -70℃过夜→转液氮保存 复苏过程：40℃水浴→90s内，溶解→1500 rpm，3 min→弃上清，培养基重悬→T75培养瓶培养，5% CO2,37℃，DMEM+20%FBS+双抗 问题：部分细胞复苏之后，大量死亡，有的甚至全部死亡；此类细胞中，部分细胞复苏起来后死的就很多，部分细胞过几个小时后死亡 作出的努力：1、在添加饲养细胞的24孔板内复苏，能抢救一部分，但耗时 2、冻存数目增加，占的位置太多，且仍然不能解决 3、试过不同的冻存液配方，FBS20%、50%、90%都没有明显的改善 最近一次发现，-70保存后复苏比液氮保存后复苏的效果要好很多，这说明我在转液氮的时候出问题了么？可是不是很明白会出啥问题呢~~ 请大家都来说一说哈！ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
Gary张» 猜你喜欢
心脉受损
已经有8人回复
-
之前让一硕士生水了7个发明专利，现在这7个获批发明专利的维护费可从哪儿支出哈？
已经有9人回复
-
博士申请都是内定的吗？
已经有8人回复
-
博士读完未来一定会好吗
已经有32人回复
-
读博
已经有5人回复
-
投稿精细化工
已经有4人回复
-
高职单位投计算机相关的北核或SCI四区期刊推荐，求支招！
已经有4人回复
-
导师想让我从独立一作变成了共一第一
已经有9人回复
-
Springer期刊投稿求助
已经有4人回复
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
祝福 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
36楼2014-05-28 16:41:15
chentao
至尊木虫 (文学泰斗)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 84799.7
- 红花: 7
- 帖子: 64074
- 在线: 984.2小时
- 虫号: 203675
- 注册: 2006-03-02
- 专业: 催化化学
2楼2014-05-28 15:52:04
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
|
， [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2014-05-28 15:53:00
★
随游(金币+1): 谢谢参与
随游(金币+1): 谢谢参与
 |
6楼2014-05-28 16:02:39