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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 分子量接近，电荷接近的蛋白质怎么分离开来？
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-05-29 17:22:56
但是双向电泳胶的回收比较麻烦。你可以试试沉淀法。用不同浓度的盐溶液进行沉淀。或者用疏水层析。

沉淀法用过了，硫酸铵沉淀的也是有两种酶的活性。好像还是分不开
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11楼2014-05-30 10:05:05
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果要看是不是两种酶或者一种酶，你可以跑一个长的分子筛，然后收集样品峰进行酶活测定。
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12楼2014-06-04 13:01:18
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greety0918

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以试试疏水层析，或者查查有没有相关的亲和介质
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终于硕士毕业了,解放ing
13楼2014-06-07 09:52:44
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-06-04 13:01:18
如果要看是不是两种酶或者一种酶，你可以跑一个长的分子筛，然后收集样品峰进行酶活测定。

老板说让跑天然电泳试试，天然电泳是不是也算一种分子筛？
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14楼2014-06-08 10:13:46
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laohuwang14

新虫 (初入文坛)
如蛋白质的电荷相同，要将他们分开，可以根据他们不同分子量或不同疏水性将他们分开。
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15楼2014-06-08 13:48:17
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laohuwang14

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 笑笑打dota at 2014-06-08 10:13:46
老板说让跑天然电泳试试，天然电泳是不是也算一种分子筛？...

天然电泳应该是算一种分子筛，蛋白是在非变性条件下，跑得快慢取决蛋白分子自身带点量和分子的三维结构大小。
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16楼2014-06-08 13:56:59
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笑笑打dota

金虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by laohuwang14 at 2014-06-08 13:56:59
天然电泳应该是算一种分子筛，蛋白是在非变性条件下，跑得快慢取决蛋白分子自身带点量和分子的三维结构大小。...

恩，好的，谢谢啦，我去试试看
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17楼2014-06-09 08:59:06
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