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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 9k培养基分离氧化亚铁硫杆菌
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ciceyh

新虫 (初入文坛)

[求助] 9k培养基分离氧化亚铁硫杆菌 已有2人参与

我最近在分离氧化亚铁硫杆菌，用的9k培养基。先用污泥在9k液体培养基中富集，富集了几代了，9k培养基变成红色了。然后我在9k固体培养基上涂布，但没长出菌来，为什么呢？我是30度培养，配方是硫酸铵3g，磷酸氢二钾0.5g，氯化钾0.1g，七水合硫酸镁0.5g，硝酸钙0.01g＋800ml水＋15g琼脂粉，灭菌稍冷后加入硫酸亚铁溶液（44.78g＋200ml水，过滤灭菌），ph调到了2-2.5左右。
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1楼 2014-05-26 19:14:30
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envy99

铜虫 (初入文坛)
请问 你有 氧化亚铁硫杆菌菌株吗？
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的
2楼2014-06-27 16:03:51
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ligexuexuan

木虫 (小有名气)

李博士

【答案】应助回帖

氧化亚铁硫杆菌在有琼脂的平板上几乎不生长，现在A.f菌就是面临这个问题，所以氧化亚铁硫杆菌固体培养基的开发也是一个研究课题。
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学海无涯终须渡，彼岸花开又一年！
3楼2014-09-08 01:01:11
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

你咋又来咧。。。。上次我说的不管用么？谁说af在琼脂上不长捏。。。。只不过浓度要低些而已。如果铁培养基不行，果断换硫培养基撒，但是里面的连四硫酸钾必须买进口的。国产我用过，含量太低。

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4楼2014-09-08 07:45:03
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-09-08 07:45:03
你咋又来咧。。。。上次我说的不管用么？谁说af在琼脂上不长捏。。。。只不过浓度要低些而已。如果铁培养基不行，果断换硫培养基撒，但是里面的连四硫酸钾必须买进口的。国产我用过，含量太低。
...

9k固体长的很慢，且铁要加多些，配置时切勿直接混合，等琼脂不烫手再混。ph值控制在2.5-4之间，长大概15天才行，培养箱最好是带隔水的，不要用热电。琼脂浓度1%以下才行，高了会抑制。我们试过平板里面加点果胶和透明质酸锁水，效果蛮好。但只能加大概5-50ppm的量。多了抑制。现在有种藻酸盐平板比琼脂好一点。。不过没用过，听说而已

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5楼2014-09-08 07:54:35
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ciceyh: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！我再努力 2014-09-09 14:05:43
要早两年，直接寄纯菌给你了。。。毕业了啊。我的菌可以长到10^9数量级，驯化过程花了我一年时间。分离用了一年半，加鉴定。特别难分离的，你慢慢来，做了多少平板啊。我们以前是配制了大概960多块平板。分离出大概17种菌。af是其中之一

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6楼2014-09-08 08:00:57
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qingyueziran

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-09-08 08:00:57
要早两年，直接寄纯菌给你了。。。毕业了啊。我的菌可以长到10^9数量级，驯化过程花了我一年时间。分离用了一年半，加鉴定。特别难分离的，你慢慢来，做了多少平板啊。我们以前是配制了大概960多块平板。分离出大概 ...

能告诉我一升的培养基应该加多少克的四水和硫酸亚铁吗😊

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7楼2015-01-10 23:54:19
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qingyueziran

金虫 (初入文坛)
楼主用的配方是正确的吗？为啥我看到有人说44多克的硫酸铁是法国的一个人算错了，后面一堆人跟着错呀😂

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8楼2015-01-10 23:57:58
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