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ciceyh

新虫 (初入文坛)

[求助] 9k培养基分离氧化亚铁硫杆菌 已有2人参与

我最近在分离氧化亚铁硫杆菌,用的9k培养基。先用污泥在9k液体培养基中富集,富集了几代了,9k培养基变成红色了。然后我在9k固体培养基上涂布,但没长出菌来,为什么呢?我是30度培养,配方是硫酸铵3g,磷酸氢二钾0.5g,氯化钾0.1g,七水合硫酸镁0.5g,硝酸钙0.01g+800ml水+15g琼脂粉,灭菌稍冷后加入硫酸亚铁溶液(44.78g+200ml水,过滤灭菌),ph调到了2-2.5左右。
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envy99

铜虫 (初入文坛)

请问 你有 氧化亚铁硫杆菌菌株吗?
2楼2014-06-27 16:03:51
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ligexuexuan

木虫 (小有名气)

李博士

【答案】应助回帖

氧化亚铁硫杆菌在有琼脂的平板上几乎不生长,现在A.f菌就是面临这个问题,所以氧化亚铁硫杆菌固体培养基的开发也是一个研究课题。
学海无涯终须渡,彼岸花开又一年!
3楼2014-09-08 01:01:11
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

你咋又来咧。。。。上次我说的不管用么?谁说af在琼脂上不长捏。。。。只不过浓度要低些而已。如果铁培养基不行,果断换硫培养基撒,但是里面的连四硫酸钾必须买进口的。国产我用过,含量太低。

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4楼2014-09-08 07:45:03
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-09-08 07:45:03
你咋又来咧。。。。上次我说的不管用么?谁说af在琼脂上不长捏。。。。只不过浓度要低些而已。如果铁培养基不行,果断换硫培养基撒,但是里面的连四硫酸钾必须买进口的。国产我用过,含量太低。
...

9k固体长的很慢,且铁要加多些,配置时切勿直接混合,等琼脂不烫手再混。ph值控制在2.5-4之间,长大概15天才行,培养箱最好是带隔水的,不要用热电。琼脂浓度1%以下才行,高了会抑制。我们试过平板里面加点果胶和透明质酸锁水,效果蛮好。但只能加大概5-50ppm的量。多了抑制。现在有种藻酸盐平板比琼脂好一点。。不过没用过,听说而已

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5楼2014-09-08 07:54:35
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
ciceyh: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢!我再努力 2014-09-09 14:05:43
要早两年,直接寄纯菌给你了。。。毕业了啊。我的菌可以长到10^9数量级,驯化过程花了我一年时间。分离用了一年半,加鉴定。特别难分离的,你慢慢来,做了多少平板啊。我们以前是配制了大概960多块平板。分离出大概17种菌。af是其中之一

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6楼2014-09-08 08:00:57
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qingyueziran

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by snoopytbw at 2014-09-08 08:00:57
要早两年,直接寄纯菌给你了。。。毕业了啊。我的菌可以长到10^9数量级,驯化过程花了我一年时间。分离用了一年半,加鉴定。特别难分离的,你慢慢来,做了多少平板啊。我们以前是配制了大概960多块平板。分离出大概 ...

能告诉我一升的培养基应该加多少克的四水和硫酸亚铁吗😊

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7楼2015-01-10 23:54:19
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qingyueziran

金虫 (初入文坛)

楼主用的配方是正确的吗?为啥我看到有人说44多克的硫酸铁是法国的一个人算错了,后面一堆人跟着错呀😂

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8楼2015-01-10 23:57:58
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