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用gDNA构建35S启动子重组体可行吗？要不要加5'UTR?
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去年尝试克隆我的基因的全长CDS，可是一直找不到阳性克隆菌落。老板就说可能是因为这个蛋白是膜蛋白，对大肠杆菌有毒性。后来就没做成35s过表达的克隆。 今年，老板又建议用gDNA连接35S来试试。可我搜不到用gDNA克隆的35S重组体相关的文献做参考。 要不要在起始密码子前加上UTR呢？老板的意思是要加上。导致我现在在怀疑去年做不出来是不是就因为没有加UTR，多疑的毛病又犯了。 有没有人做过类似的克隆？多谢了！ |
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