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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 缓冲液留在色谱柱中过夜会损坏柱子吗？
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human1234

木虫 (著名写手)

[交流] 缓冲液留在色谱柱中过夜会损坏柱子吗？ 已有8人参与

昨天跑完样品就深夜12点了，整栋楼就剩下我自己一个女孩子，内心忐忑恐惧各种纠结，于是跑完最后一个样品就果断关机，早上来了跑基线才发现一个很严重的问题，基线跑得杂乱无章，跑了几个小时还是乱七八糟的，百度一搜发现很多地方都说：绝对禁止将缓冲液留在柱子中过夜！瞬间紧张了.......
   我的流动相是pH为4.5的乙酸铵缓冲液，用乙酸调的pH，用完之后没冲柱子，直接关机了，想着一早就要过来，也就六七个小时应该没事吧，结果早上来了刚开始跑基线时陆陆续续会出一些峰，这些峰的峰形都是正常的，可是再后来就杂乱无章。请问这是什么原因，柱子会坏了吗？有没有解决的办法，万分着急加感谢！
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1楼 2014-05-22 11:30:04
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wolaile35

木虫 (小有名气)
★
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按照楼上的，小流速0.2ml/min，10%乙腈/90%水，冲洗久一点，再换成纯甲醇或乙腈冲洗，观察柱压和基线！以后还有缓冲盐千万别过夜，急的话用小流速平衡着。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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10楼2014-05-22 14:07:22
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普通回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
赶紧重生柱子吧 应该不会有问题的

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human1234
青山不断，绿水长流
2楼2014-05-22 11:44:48
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human1234

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-22 11:44:48
赶紧重生柱子吧 应该不会有问题的

太感谢你的回复让我稍微平复了一点点紧张的情绪了，请问怎么重生柱子
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......
3楼2014-05-22 11:49:56
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xdx1984

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
压力怎么样，变化大不
使用的是C18填料的柱子么
流动相中没有机相是吧
你早上来没用低比例的有机相冲一下柱子么（例如10%甲醇水）
停了一晚上，缓冲盐可能在柱子中有析出了吧，直接就走流动相肯定不行的
你可以再详细说说，大家也好帮你分析哈
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4楼2014-05-22 11:53:11
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human1234

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xdx1984 at 2014-05-22 11:53:11
压力怎么样，变化大不
使用的是C18填料的柱子么
流动相中没有机相是吧
你早上来没用低比例的有机相冲一下柱子么（例如10%甲醇水）
停了一晚上，缓冲盐可能在柱子中有析出了吧，直接就走流动相肯定不行的
你可 ...

嗯嗯，是C18柱，柱压时高时低，流动相是乙酸铵（pH=4,5）:乙腈=75:25，我早上开机就直接用流动相来跑基线的，刚开始还挺正常，有陆陆续续的峰出现，还以为可能是前天残留的物质，可是后来就不行了，那出的都不知道叫什么，乱七八糟，高高低低的，看起来很渗人，请问该怎么办，如果柱子坏了，我会被骂死的
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......
5楼2014-05-22 11:59:02
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
问题应该不大 马上把盐冲出来哈 然后活化
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6楼2014-05-22 12:00:21
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human1234

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2014-05-22 12:00:21
问题应该不大 马上把盐冲出来哈 然后活化

现在基线跑的越来越恐怖了，请问我应该用什么溶剂冲，怎么活化呀
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7楼2014-05-22 12:03:51
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轩辕义

铜虫 (正式写手)
★
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首先，遇到这样的情况，别着急，小MM.其次，可以重生柱子了。把你的柱子的填料，基线图，还有你的样品发出来看看吧。这样比较容易解决问题
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8楼2014-05-22 12:33:35
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xdx1984

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by human1234 at 2014-05-22 11:59:02
嗯嗯，是C18柱，柱压时高时低，流动相是乙酸铵（pH=4,5）:乙腈=75:25，我早上开机就直接用流动相来跑基线的，刚开始还挺正常，有陆陆续续的峰出现，还以为可能是前天残留的物质，可是后来就不行了，那出的都不知道 ...

跟大家建议基本一致，10%乙腈水，0.4mL/min流速先把盐冲出来。建议这个流速冲至少2到3小时。
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9楼2014-05-22 13:38:29
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