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human1234

木虫 (著名写手)

[交流] 缓冲液留在色谱柱中过夜会损坏柱子吗? 已有8人参与

昨天跑完样品就深夜12点了,整栋楼就剩下我自己一个女孩子,内心忐忑恐惧各种纠结,于是跑完最后一个样品就果断关机,早上来了跑基线才发现一个很严重的问题,基线跑得杂乱无章,跑了几个小时还是乱七八糟的,百度一搜发现很多地方都说:绝对禁止将缓冲液留在柱子中过夜!瞬间紧张了.......
   我的流动相是pH为4.5的乙酸铵缓冲液,用乙酸调的pH,用完之后没冲柱子,直接关机了,想着一早就要过来,也就六七个小时应该没事吧,结果早上来了刚开始跑基线时陆陆续续会出一些峰,这些峰的峰形都是正常的,可是再后来就杂乱无章。请问这是什么原因,柱子会坏了吗?有没有解决的办法,万分着急加感谢!
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wolaile35

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
按照楼上的,小流速0.2ml/min,10%乙腈/90%水,冲洗久一点,再换成纯甲醇或乙腈冲洗,观察柱压和基线!以后还有缓冲盐千万别过夜,急的话用小流速平衡着。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2014-05-22 14:07:22
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普通回帖

HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
赶紧重生柱子吧 应该不会有问题的

[ 发自小木虫客户端 ]

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青山不断,绿水长流
2楼2014-05-22 11:44:48
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human1234

木虫 (著名写手)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-05-22 11:44:48
赶紧重生柱子吧 应该不会有问题的

太感谢你的回复让我稍微平复了一点点紧张的情绪了,请问怎么重生柱子
......
3楼2014-05-22 11:49:56
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xdx1984

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
压力怎么样,变化大不
使用的是C18填料的柱子么
流动相中没有机相是吧
你早上来没用低比例的有机相冲一下柱子么(例如10%甲醇水)
停了一晚上,缓冲盐可能在柱子中有析出了吧,直接就走流动相肯定不行的
你可以再详细说说,大家也好帮你分析哈
4楼2014-05-22 11:53:11
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human1234

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xdx1984 at 2014-05-22 11:53:11
压力怎么样,变化大不
使用的是C18填料的柱子么
流动相中没有机相是吧
你早上来没用低比例的有机相冲一下柱子么(例如10%甲醇水)
停了一晚上,缓冲盐可能在柱子中有析出了吧,直接就走流动相肯定不行的
你可 ...

嗯嗯,是C18柱,柱压时高时低,流动相是乙酸铵(pH=4,5):乙腈=75:25,我早上开机就直接用流动相来跑基线的,刚开始还挺正常,有陆陆续续的峰出现,还以为可能是前天残留的物质,可是后来就不行了,那出的都不知道叫什么,乱七八糟,高高低低的,看起来很渗人,请问该怎么办,如果柱子坏了,我会被骂死的
......
5楼2014-05-22 11:59:02
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题应该不大 马上把盐冲出来哈 然后活化
6楼2014-05-22 12:00:21
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human1234

木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lifucheng at 2014-05-22 12:00:21
问题应该不大 马上把盐冲出来哈 然后活化

现在基线跑的越来越恐怖了,请问我应该用什么溶剂冲,怎么活化呀
......
7楼2014-05-22 12:03:51
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轩辕义

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
首先,遇到这样的情况,别着急,小MM.其次,可以重生柱子了。把你的柱子的填料,基线图,还有你的样品发出来看看吧。这样比较容易解决问题
8楼2014-05-22 12:33:35
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xdx1984

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by human1234 at 2014-05-22 11:59:02
嗯嗯,是C18柱,柱压时高时低,流动相是乙酸铵(pH=4,5):乙腈=75:25,我早上开机就直接用流动相来跑基线的,刚开始还挺正常,有陆陆续续的峰出现,还以为可能是前天残留的物质,可是后来就不行了,那出的都不知道 ...

跟大家建议基本一致,10%乙腈水,0.4mL/min流速先把盐冲出来。建议这个流速冲至少2到3小时。
9楼2014-05-22 13:38:29
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