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jasonwyb123

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[求助] picogreen ds DNA实验相关问题

最近在用invitrogen公司的picogreen dsDNA 试剂盒检测残留DNA 一直出现问题，请相关大虾帮忙解决一下：
①标曲用2倍稀释和10倍稀释，做出标曲r方很差，不能达到0.99，一般最开始两个点差别最大
②具体加picogreen 燃料时是如何加的？我现在是把所有标准品和样品都100ul放好，之后用排枪一起加，之后避光显色五分钟左右（染色时间好像和信号响应影响挺大，为何？）
③试剂盒7月份到期，现在用会出现问题吗？
④样品稀释测残DNA值不是很高，但用RNase处理1h后，发现几乎有10倍量的降低，这说明我样品里含有大量RNA？RNA在室温条件下不是极不稳定易降解吧，怎么可能还能测到？另外，该试剂盒不是不收rna或ssDNA的影响吗？
⑤样品中加入一些蛋白酶消化一下，发现残DNA竟然增加，如何解释！

谢谢大虾帮助，如果完美解决问题，将会追加金币！

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