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jasonwyb123金虫 (小有名气)
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[求助]
picogreen ds DNA实验相关问题
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最近在用invitrogen公司的picogreen dsDNA 试剂盒检测残留DNA 一直出现问题，请相关大虾帮忙解决一下： ①标曲用2倍稀释和10倍稀释，做出标曲r方很差，不能达到0.99，一般最开始两个点差别最大 ②具体加picogreen 燃料时是如何加的？我现在是把所有标准品和样品都100ul放好，之后用排枪一起加，之后避光显色五分钟左右（染色时间好像和信号响应影响挺大，为何？） ③试剂盒7月份到期，现在用会出现问题吗？ ④样品稀释测残DNA值不是很高，但用RNase处理1h后，发现几乎有10倍量的降低，这说明我样品里含有大量RNA？RNA在室温条件下不是极不稳定易降解吧，怎么可能还能测到？另外，该试剂盒不是不收rna或ssDNA的影响吗？ ⑤样品中加入一些蛋白酶消化一下，发现残DNA竟然增加，如何解释！ 谢谢大虾帮助，如果完美解决问题，将会追加金币！ |
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