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yangjingjing

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by purRRRRRRRRR at 2014-05-25 01:03:37
对于你这种菜鸟我只想说de3是有t7启动子的。
...

哈哈~菜鸟只见过rosetta和bl21的，谢谢指教
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努力打败一切
11楼2014-05-25 15:52:37
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miao1991

新虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
12楼2014-05-25 19:10:32
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PI4K

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
linkv8: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-26 19:34:45
1. BL21 is different from BL21 DE3, which has lac control to prevent leakage before IPTG induction.
2. Try use pET17 or earlier version and pMal-c5x.
3. Cell: C41 or rosetta Gammii 2
4. For expression: proetein-pET17 in C41. using very riched media,
prepare 10ul overnight culture and add to 500ml media.
start your growth on Friday at room temperature or even low temp.
harvest you pellets on Monday.
For growth under 4C, 1 week.
DON'T ADD ANY IPTG and NO inductioin.

The whole idea is to use the lac leakage to expression the protein with proper fold.

Good luck
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13楼2014-05-26 00:31:41
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linkv8

银虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by yangjingjing at 2014-05-25 00:40:34
DE3不就是BL21吗？莫非我又菜鸟了？你有加标签吗？

加标签，可是不表达也没用啊
有BL21(DE3)、C41(DE3),等等
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14楼2014-05-26 19:26:29
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linkv8

银虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by miao1991 at 2014-05-25 19:10:32
我有c41 c43  可以联系我  275515   7061

谢谢！
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15楼2014-05-26 19:33:39
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linkv8

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by PI4K at 2014-05-26 00:31:41
1. BL21 is different from BL21 DE3, which has lac control to prevent leakage before IPTG induction.
2. Try use pET17 or earlier version and pMal-c5x.
3. Cell: C41 or rosetta Gammii 2
4. For expres ...

Thank U!
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16楼2014-05-26 19:34:29
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linkv8

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by PI4K at 2014-05-26 00:31:41
1. BL21 is different from BL21 DE3, which has lac control to prevent leakage before IPTG induction.
2. Try use pET17 or earlier version and pMal-c5x.
3. Cell: C41 or rosetta Gammii 2
4. For expres ...

麻烦请问一下， C41的培养基用LB行吗？
还是有特定的摇瓶培养？
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17楼2014-06-11 20:58:33
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linkv8

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopyzxx at 2014-05-21 20:53:45
找到了吗？我这里有。

麻烦请问一下， C41的培养基用LB行吗？
还是有特定的摇瓶培养？
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18楼2014-06-11 20:58:44
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miao1992

新虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
19楼2014-06-11 21:46:35
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donkey2014

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopyzxx at 2014-05-21 20:53:45
找到了吗？我这里有。

你好，我想表达膜蛋白的，想拿C41（DE3)试一下，请问你那还有吗？
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20楼2015-09-29 13:22:50
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