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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酶的定位、离心转速-- 检测酶存在于细胞内、细胞膜/壁还是细胞外
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liuzeying

银虫 (初入文坛)

[求助] 酶的定位、离心转速-- 检测酶存在于细胞内、细胞膜/壁还是细胞外 已有1人参与

新虫求助：
1.检测酶存在于细胞内、细胞膜/质还是细胞外，但是离心时不知道转速该是多少。比如破碎细胞后，分离细胞膜/细胞壁与胞内酶的时候，转速太低，担心还有细胞碎片没有沉淀下来；转速太高，担心胞内酶沉淀下来与细胞碎片混在一起。
2.细胞膜或者细胞壁上的酶会不会溶解到水中，与胞内酶混合，导致实验结论错误。
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小土豆
1楼 2014-05-20 10:58:04
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亡佚

至尊木虫 (正式写手)

玩细胞的小逗逼~

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+1 2014-05-20 20:44:19
如果条件允许，将酶连上荧光蛋白，用荧光显微镜观察可以知道在胞内还是胞外~
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凡所有相，皆為虛妄。
2楼2014-05-20 19:20:37
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liuzeying

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 亡佚 at 2014-05-20 19:20:37
如果条件允许，将酶连上荧光蛋白，用荧光显微镜观察可以知道在胞内还是胞外~

可是酶的基因序列没有调出来。这个最起码要知道一段保守序列了吧O(∩_∩)
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小土豆
3楼2014-05-21 09:07:47
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亡佚

至尊木虫 (正式写手)

玩细胞的小逗逼~
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzeying at 2014-05-21 09:07:47
可是酶的基因序列没有调出来。这个最起码要知道一段保守序列了吧O(∩_∩)...

那你做个梯度离心试试？
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凡所有相，皆為虛妄。
4楼2014-05-21 12:35:27
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liuzeying

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 亡佚 at 2014-05-21 12:35:27
那你做个梯度离心试试？...

想看看酶是在胞内还是膜/壁上，所以细胞破碎后，通过分别检测上清和沉淀物来初步确定酶的位置。你说的梯度离心时自己做几个不同转速呢还是密度梯度离心呢，不太明白ing。
还有，，细胞膜或周质蛋白一直附着在上面，还是会溶解到溶液中啊，困惑。。。
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小土豆
5楼2014-05-23 08:53:29
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亡佚

至尊木虫 (正式写手)

玩细胞的小逗逼~
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuzeying at 2014-05-23 08:53:29
想看看酶是在胞内还是膜/壁上，所以细胞破碎后，通过分别检测上清和沉淀物来初步确定酶的位置。你说的梯度离心时自己做几个不同转速呢还是密度梯度离心呢，不太明白ing。
还有，，细胞膜或周质蛋白一直附着在上面 ...

密度梯度啊，看下酶所在的大概位置~
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凡所有相，皆為虛妄。
6楼2014-05-23 13:01:41
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liuzeying

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 亡佚 at 2014-05-23 13:01:41
密度梯度啊，看下酶所在的大概位置~...

哦了
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小土豆
7楼2014-05-26 17:02:19
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