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我是小李飞刀

新虫 (小有名气)

[求助] PCR阴性没有条带 但是样品全都有条带,这是什么情况

各位虫友大家好!我去年夏天花粉管通道法对棉花进行转化,拿到种子后今年种上,提DNA进行PCR筛选转基因植株,可奇怪的是阴性对照没有条带,而样品则全部呈现目的条带(用的两对引物 全都有条带)。已经提了三轮了(将近200株),每轮都不断完善防止提DNA时可能发生的污染,但依旧是条带闪闪一片亮啊。这简直是不可能发生的事情啊。各位虫友有遇到这种情况吗?或是有好的建议,拯救一下我吧!我感觉已经没有可以换的实验器具或是试剂药品了,再换只能换实验室了。。。。
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chen2012213

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

阴性对照本来就没有条带,只有阳性对照有的,你放阳性对照没?
2楼2014-05-23 08:22:57
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我是小李飞刀

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chen2012213 at 2014-05-23 08:22:57
阴性对照本来就没有条带,只有阳性对照有的,你放阳性对照没?

是的,阴性对照没条带,阳性对照有条带,也就是说两个对照没问题,奇怪的是将近200个样品均有条带,也就是说结果显示都是转基因,这是不可能的事情。我怀疑是引物的问题,已经重新设计合成引物等待结果验证了。。。
3楼2014-05-23 21:35:17
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