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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » PCR阴性没有条带 但是样品全都有条带，这是什么情况
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我是小李飞刀

新虫 (小有名气)

[求助] PCR阴性没有条带 但是样品全都有条带，这是什么情况

各位虫友大家好！我去年夏天花粉管通道法对棉花进行转化，拿到种子后今年种上，提DNA进行PCR筛选转基因植株，可奇怪的是阴性对照没有条带，而样品则全部呈现目的条带（用的两对引物 全都有条带）。已经提了三轮了（将近200株），每轮都不断完善防止提DNA时可能发生的污染，但依旧是条带闪闪一片亮啊。这简直是不可能发生的事情啊。各位虫友有遇到这种情况吗？或是有好的建议，拯救一下我吧！我感觉已经没有可以换的实验器具或是试剂药品了，再换只能换实验室了。。。。
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1楼 2014-05-19 20:33:16
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chen2012213

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

阴性对照本来就没有条带，只有阳性对照有的，你放阳性对照没？
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2楼2014-05-23 08:22:57
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我是小李飞刀

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chen2012213 at 2014-05-23 08:22:57
阴性对照本来就没有条带，只有阳性对照有的，你放阳性对照没？

是的，阴性对照没条带，阳性对照有条带，也就是说两个对照没问题，奇怪的是将近200个样品均有条带，也就是说结果显示都是转基因，这是不可能的事情。我怀疑是引物的问题，已经重新设计合成引物等待结果验证了。。。
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3楼2014-05-23 21:35:17
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