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proteinwang铜虫 (正式写手)
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[交流]
枯草芽孢杆菌生长曲线的测定具体应该怎么做？
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大家好，我想测一下我得枯草芽孢杆菌在我的优化后培养基中的生长曲线，不知道怎么测定，请又相关经验的高手指点。 譬如测定的波长，菌体是否需要离心，测定过程中OD值在什么范围内菌体浓度与OD值之间成直线关系。 [ Last edited by telomerase on 2008-3-18 at 20:44 ] |
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proteinwang
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3楼2008-03-16 18:36:07
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2楼2008-03-15 22:41:44
reasonspare
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4楼2008-03-17 04:30:29
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关于波长选择上面，不同文献中选择的具体波长有所不同。但是波长的选择有一个前提，就是该波长不能干扰测定。具体说，就是微生物生长过程中产生和消耗的物质不能在该波长下有强烈的吸收，最好在该波长下面，OD值不随物质量的变化而变化。一般在500-700范围内选择。 更为精确的做法为：取1ml菌液，离心后，倾去上清液，加入1ml无菌生理盐水，制成菌悬液。再离心。反复3-5次。适当稀释，使OD介于 0.5-2.0 之间。在400-700nm范围内进行波长扫描，如果有最大吸收，则选择该波长为测定波长。如果扫描波长曲线平稳变化，则可以选择400-700范围内任意值作为测定波长。 测定波长选定后，就按照楼上reasonspare兄的方法绘制生长曲线啦。 该方法的有个明显的缺点就是操作繁琐啊。 |
5楼2008-03-17 10:22:30