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proteinwang

铜虫 (正式写手)

[交流] 枯草芽孢杆菌生长曲线的测定具体应该怎么做?

大家好,我想测一下我得枯草芽孢杆菌在我的优化后培养基中的生长曲线,不知道怎么测定,请又相关经验的高手指点。
譬如测定的波长,菌体是否需要离心,测定过程中OD值在什么范围内菌体浓度与OD值之间成直线关系。

[ Last edited by telomerase on 2008-3-18 at 20:44 ]
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proteinwang

铜虫 (正式写手)

急问呐,请求支援
2楼2008-03-15 22:41:44
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proteinwang

铜虫 (正式写手)

看来高手有周末休息的习惯啊!
3楼2008-03-16 18:36:07
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reasonspare

木虫 (著名写手)

分光光度计的最佳线形范围,应该控制在OD= 0.5-2.0 之间.
波长就选择600,
通过不同倍数的稀释, 分成两等份,一个稀释涂平板,计菌落数
另一测其OD值,

然后采用 菌落数的对数和OD作曲线.R值到0.9以上可以了.

这个公式 如如果条件不变可以作为经验长期使用.
大慈大悲观世音救苦救难观世音有求必应观世音普渡众生观世音千手千眼观世音官大敢管观世音无处不在观世音普观普长观世音南无观世音菩萨
4楼2008-03-17 04:30:29
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vicarner

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):比我的还专业,赞一个
关于波长选择上面,不同文献中选择的具体波长有所不同。但是波长的选择有一个前提,就是该波长不能干扰测定。具体说,就是微生物生长过程中产生和消耗的物质不能在该波长下有强烈的吸收,最好在该波长下面,OD值不随物质量的变化而变化。一般在500-700范围内选择。

更为精确的做法为:取1ml菌液,离心后,倾去上清液,加入1ml无菌生理盐水,制成菌悬液。再离心。反复3-5次。适当稀释,使OD介于 0.5-2.0 之间。在400-700nm范围内进行波长扫描,如果有最大吸收,则选择该波长为测定波长。如果扫描波长曲线平稳变化,则可以选择400-700范围内任意值作为测定波长。
测定波长选定后,就按照楼上reasonspare兄的方法绘制生长曲线啦。
该方法的有个明显的缺点就是操作繁琐啊。
5楼2008-03-17 10:22:30
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proteinwang

铜虫 (正式写手)

感谢诸位的解答!
6楼2008-03-17 23:37:45
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booksworm

铜虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币-1,VIP+0):兄弟,好像你说的不对,科研对任何人都是严格的, 我们的态度,是乐于助人,简单 easy 是对某些人而言,, 刚刚走入生物,任何问题都是新的/...哈哈哈哈, 扣除一个示以警告.
不知道你是否学了生物,这么简单的问题希望以后不要在这里发问了
幼稚!!!!!!!!!!!!
7楼2008-03-18 10:12:43
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proteinwang

铜虫 (正式写手)

reasonspare(金币+0,VIP+0):这种赌气地话, 我也不希望在生物版看到, 大家都是为了追寻一个答案,如果再次遇到这样的问题,你可选择向每一个斑竹举报,让斑竹来处理, 如果互相对持, 就会有损科研氛围.
楼上的朋友,我想如果你不是因为“幼稚”的原因,也不会说出这样的话了,所以我就原谅你了。
8楼2008-03-18 18:39:37
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