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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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激情海洋

银虫 (小有名气)

[交流] 转基因烟草检测求助

请问大家:我的转基因烟草鉴定,提总DNA用35S和我的基因下游引物作PCR,为何野生型的总是出带?换了引物也不行,引物和buffer等都没有问题,DNA条带质量也很好。我该怎么做?不知大家遇没遇到这种情况?谢谢!
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激情海洋

银虫 (小有名气)

我也试过用卡那抗性的基因NPT2,也出带,呵呵,真没办法。
6楼2008-03-16 18:10:17
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

★ ★
asr(金币+2,VIP+0)::P 欢迎常来交流!
专门检测35S启动子吧,或检测NOS终止子吧,或检测靶基因,或抗性基因。再从提一次模板吧,别有污染。或者你的野生型没准是转基因的呢!
细推物理须行乐。
2楼2008-03-15 17:15:41
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 关注,.
楼上的说的有道理
不过现在市场上应该没有转基因的烟草种子。
我也遇见过这种现象:所有的样品都有结果,换了引物就可以了
当时我设计引物是用的是Primer5软件,选得是最好扩的那条RAT=88,最后所有的样品都有条带,而且很亮。
师姐说,如果与目的基因差异大的话,可以作为内参基因使检测更完善,说我是因祸得福!
你试着设计一条靶基因的特异引物,不求最好扩,但求特异
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
3楼2008-03-15 20:09:45
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

你可以测策序看到底是什么被扩出来了。
细推物理须行乐。
4楼2008-03-15 20:25:12
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