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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教，转基因的问题
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

[交流] 请教，转基因的问题

我克隆了一个基因片段，全基因序列中有一内含子
想把这个基因转移到蔬菜作物上
载体PBI121，片段1123bp
不知道内含子会不会影响基因的表达，蛋白的活性？
如果有影响的话，怎么把内含子去掉？
谢谢
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
1楼 2008-03-15 15:05:43
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
你的基因是真核微生物源的基因吗？你最好把它去掉，因为从稳定性、载体连接效率、转化效率等等考虑，长片断不如短片断。最好做反转录PCR，得到cDNA再克隆表达。
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细推物理须行乐。
2楼2008-03-15 15:13:15
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xiaoyur

金虫 (著名写手)
真核生物的
本想着扩出来就完事了，可以进行突飞猛进了
没想到整出个内含子来
哎。。。。。。。
谢谢楼上的
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
3楼2008-03-15 16:49:09
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
做试验可不能着急呀，越着急越出乱子！！！
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细推物理须行乐。
4楼2008-03-15 17:11:01
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yzdjyj

铁杆木虫 (正式写手)
如果就是你所转的蔬菜品种内源的，我个人觉得不去更好，内含子在功能上也是有作用的，反正片段也不长。
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撇捺人生
5楼2008-03-15 17:11:03
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xiaoyur

金虫 (著名写手)
我查了一下文献
有的说，内含子还增强表达，
很有意思
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
6楼2008-03-15 22:05:10
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人
又需要学习了，一起加油！！
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细推物理须行乐。
7楼2008-03-15 22:09:46
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jerome711

银虫 (小有名气)
5楼从那里看到的？能给我发一份吗？jerome711@sina.com
谢谢了，我最近也要做重组。
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做懂得生活的人
8楼2008-03-15 23:20:36
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2008/3/15 22:05:
我查了一下文献
有的说，内含子还增强表达，
很有意思

是啊，我也看到过相似的文献。
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
9楼2008-03-16 08:47:40
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xiaoyur

金虫 (著名写手)
不过
不知道
从单子叶植物转到双子叶植物中是不是影响表达
首先，内含子剪接需不需要酶系统的参与？？
单子叶和双子叶植物的内含子剪接的酶系统是不是相同？
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
10楼2008-03-18 11:48:37
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