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xiaoyur

金虫 (著名写手)

[交流] 请教,转基因的问题

我克隆了一个基因片段,全基因序列中有一内含子
想把这个基因转移到蔬菜作物上
载体PBI121,片段1123bp
不知道内含子会不会影响基因的表达,蛋白的活性?
如果有影响的话,怎么把内含子去掉?
谢谢
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爱的反义词不是恨 而是冷漠!
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

你的基因是真核微生物源的基因吗?你最好把它去掉,因为从稳定性、载体连接效率、转化效率等等考虑,长片断不如短片断。最好做反转录PCR,得到cDNA再克隆表达。
细推物理须行乐。
2楼2008-03-15 15:13:15
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

真核生物的
本想着扩出来就完事了,可以进行突飞猛进了
没想到整出个内含子来
哎。。。。。。。
谢谢楼上的
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
3楼2008-03-15 16:49:09
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

做试验可不能着急呀,越着急越出乱子!!!
细推物理须行乐。
4楼2008-03-15 17:11:01
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yzdjyj

铁杆木虫 (正式写手)

如果就是你所转的蔬菜品种内源的,我个人觉得不去更好,内含子在功能上也是有作用的,反正片段也不长。
一个成功的男人就是让他的老婆和孩子过上幸福的生活!
5楼2008-03-15 17:11:03
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

我查了一下文献
有的说,内含子还增强表达,
很有意思
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
6楼2008-03-15 22:05:10
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lauren180

木虫 (著名写手)

小木虫挖井人

又需要学习了,一起加油!!
细推物理须行乐。
7楼2008-03-15 22:09:46
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jerome711

银虫 (小有名气)

5楼从那里看到的?能给我发一份吗?jerome711@sina.com
谢谢了,我最近也要做重组。
做懂得生活的人
8楼2008-03-15 23:20:36
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游侠892

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by xiaoyur at 2008/3/15 22:05:
我查了一下文献
有的说,内含子还增强表达,
很有意思

是啊,我也看到过相似的文献。
路漫漫其修远兮,吾将上下而求索
9楼2008-03-16 08:47:40
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xiaoyur

金虫 (著名写手)

不过
不知道
从单子叶植物转到双子叶植物中是不是影响表达
首先,内含子剪接需不需要酶系统的参与??
单子叶和双子叶植物的内含子剪接的酶系统是不是相同?
爱的反义词不是恨 而是冷漠!
10楼2008-03-18 11:48:37
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