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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 6Kbp大小的片段怎么连接转化啊
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落风吟

新虫 (初入文坛)

[交流] 6Kbp大小的片段怎么连接转化啊

我用LA Taq 从质粒上P出6K大小的片段做模版，要连接到3K大小的骨架上，现在就是能P出来，但是连不上啊~求大神指教啊~~
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1楼 2014-05-14 17:02:39
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落风吟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-15 09:23:36
按常规的ta克隆做就好

常规的T3连接效率很低啊~
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13楼2014-05-17 17:13:17
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
在6Kb片段上找酶切位点，分成2-3段慢慢来。
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7楼2014-05-14 18:21:37
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落风吟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Lau_Kimura at 2014-05-14 18:21:37
在6Kb片段上找酶切位点，分成2-3段慢慢来。

呃~再把6K的切成2-3段然后连到骨架上吗？
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8楼2014-05-14 20:55:43
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 落风吟 at 2014-05-14 20:55:43
呃~再把6K的切成2-3段然后连到骨架上吗？...

互补载体，一般就是这样的。
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9楼2014-05-14 23:02:13
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