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louisjackson

金虫 (小有名气)

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我把测序序列跟我的引物比对了一下，上游引物没有匹配的，下游引物却有一定的匹配率，如图。这说明什么问题呢？

比对.png

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It'snotaboutskill,butaboutwill.

11楼2014-05-13 18:02:15

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luwei13566

木虫 (正式写手)

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★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-16 13:15:20

晕，下游引物你需要反向互补一下再比对，你把你的测序序列，你要比对的基因序列和你的引物序列都发一份给我吧，我给你比对下，luwei13566@sina.com，你测序是TA克隆后才测的序列还是PCR后直接测的序列？

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大家相互帮助哈

12楼2014-05-13 22:11:41

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louisjackson

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-05-13 22:11:41
晕，下游引物你需要反向互补一下再比对，你把你的测序序列，你要比对的基因序列和你的引物序列都发一份给我吧，我给你比对下，luwei13566@sina.com，你测序是TA克隆后才测的序列还是PCR后直接测的序列？...

真心谢谢你了，我是PCR后直接拿产物去测的序。我马上把序列发给你，有劳了！

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It'snotaboutskill,butaboutwill.

13楼2014-05-14 15:43:19

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2013Trista

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

引用回帖:

7楼: Originally posted by louisjackson at 2014-05-12 18:58:23
我想请教一下，您的全长引物是如何设计的？我是用的在线设计软件，用前面一段序列设计一对引物，采用其上游引物；用后面一段序列设计一对引物，采用其下游引物。最后再将这上下游引物作为一对引物送去合成，然后我 ...

你P全长序列是干嘛呢？我一般用Primer premier，还可以，你不妨试试。

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14楼2014-05-14 20:07:06

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