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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 条件性基因敲除动物 基因打靶的相关系统 间的关系
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huhong1009

新虫 (初入文坛)

[求助] 条件性基因敲除动物 基因打靶的相关系统 间的关系 已有2人参与

问题一：在制作一只条件性基因敲除（CKO）动物的时候：Cre/Cox与Flp/FRT  是二选一 or 都用；
问题二：“锌指核酸酶技术、TALEN、 CRISPR-Cas9” 这三技术说的是载体设计的哪部分啊，，与 “Cre/Cox与Flp/FRT” 是什么关系？是说在CKO中这三者一定要选其一吗？
不知道我说明白没有，最近看文献看糊涂了
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1楼 2014-05-10 16:30:42
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huhong1009: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-12 10:15:21
常见的是Cre配Flp（即loxp）
CRISP-Cas9只是在特点位点切开基因组DNA，可以大大增加切口处的同源重组发生率，起辅助作用。
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3楼2014-05-11 12:14:06
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CasGene

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
huhong1009: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-12 10:15:04
可以看我写的blog
http://blog.sina.com.cn/s/blog_12d8810790101gz5w.html

只要把loxp加进去就好。传统就是加长的同源臂来同源重组。不过是在ES细胞里做。这个同源重组的效率是很低的。

现在可以用以上你说的三种酶切一刀，这样重组效率更高些。这样的话就可以直接在受精卵里面做了。
因为效率足够高。百分之几。筛选一两百个胚胎就可以了。
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2楼2014-05-10 19:41:37
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huhong1009

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-05-11 12:14:06
常见的是Cre配Flp（即loxp）
CRISP-Cas9只是在特点位点切开基因组DNA，可以大大增加切口处的同源重组发生率，起辅助作用。

嗯，谢谢。发现自己还是有点小错误：把Cre/loxP写成Cre/Cox了……
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4楼2014-05-11 13:02:21
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huhong1009

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by CasGene at 2014-05-10 19:41:37
可以看我写的blog
http://blog.sina.com.cn/s/blog_12d8810790101gz5w.html

只要把loxp加进去就好。传统就是加长的同源臂来同源重组。不过是在ES细胞里做。这个同源重组的效率是很低的。

现在可以用以上你说 ...

结合你们的回复，算是明白了，非常感谢
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5楼2014-05-11 13:04:25
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