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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)

[求助] PCR模板 已有1人参与

以DNA作为PCR的模板和以cDNA为模板PCR,测序结果为什么cDNA序列是正确的，而DNA不正确？而且同样的dna模板样品测序结果也不同，仅93%的相同？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-05-09 00:06:07
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-11 16:57:50
真核OR原核？——内含子的问题？

引物退火温度几许？——PCR特异性问题？

93%怎样计算？——究竟测了多少个克隆？
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

潇潇杨雨125
2楼2014-05-09 18:37:04
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
“同样的dna模板样品测序结果也不同，仅93%的相同”
可能是在你的PCR过程中引入了突变，建议用高保真酶来做PCR
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-05-09 22:54:32
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-09 22:54:32
“同样的dna模板样品测序结果也不同，仅93%的相同”
可能是在你的PCR过程中引入了突变，建议用高保真酶来做PCR

是真核

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-05-10 23:47:01
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Lau_Kimura at 2014-05-09 18:37:04
真核OR原核？——内含子的问题？

引物退火温度几许？——PCR特异性问题？

93%怎样计算？——究竟测了多少个克隆？

就是用的高保真酶啊

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5楼2014-05-10 23:47:56
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潇潇杨雨125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2014-05-09 22:54:32
“同样的dna模板样品测序结果也不同，仅93%的相同”
可能是在你的PCR过程中引入了突变，建议用高保真酶来做PCR

退火温度都是摸索过的，应该没问题啊

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6楼2014-05-10 23:48:50
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