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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞破碎
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cao534

银虫 (正式写手)

[交流] 细胞破碎

请教各位，细胞破碎提取其中的 酶有 什么好的方法啊/
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1楼 2008-03-12 12:48:32
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ypan

木虫 (著名写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来
等电点聚焦电泳
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2楼2008-03-12 13:58:48
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dreamsail

银虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
你是问破碎的方法吗?
不知道能不用超声波破碎法,我用来提过外膜蛋白,效果还不错.
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3楼2008-03-12 19:25:27
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cao534

银虫 (正式写手)
我 用超声波破碎法做过，但效果不好，跟没做超声波破碎法的 对照差不 多，你是用多少量做超声波破碎法
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4楼2008-03-14 15:44:01
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)
不是什么细胞都合适做超声破碎的，而且超声会产热，有时候会影响到你要提取的酶的活性。
动物细胞提取蛋白一般用lysis buffer就可以了，常规的配方很多，你看看分子克隆好了
如果是细菌或酵母，可能用超声好些，用量和你选择的超声探头的大小等均有关系
可以少量多次，效果较好
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5楼2008-03-14 18:13:36
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cauxiaogong

破碎细胞后，做什么了？
也要看你的材料了？
要是测一般的孢内物的含量或是一般的酶活性，可以用超声波，并且原核生物更适宜超声。
要是拿孢内一些小的细胞器：线粒体等，就不适合超声了，可以采用低温机械力破碎。
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6楼2008-03-25 16:18:34
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