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cao534

银虫 (正式写手)

[交流] 细胞破碎

请教各位,细胞破碎提取其中的 酶有 什么好的方法啊/
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ypan

木虫 (著名写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来
等电点聚焦电泳
2楼2008-03-12 13:58:48
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dreamsail

银虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
你是问破碎的方法吗?
不知道能不用超声波破碎法,我用来提过外膜蛋白,效果还不错.
3楼2008-03-12 19:25:27
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cao534

银虫 (正式写手)

我 用超声波破碎法做过,但效果不好,跟没做超声波破碎法的 对照差不 多,你是用多少量做超声波破碎法
4楼2008-03-14 15:44:01
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totoro一家亲

铜虫 (小有名气)

不是什么细胞都合适做超声破碎的,而且超声会产热,有时候会影响到你要提取的酶的活性。
动物细胞提取蛋白一般用lysis buffer就可以了,常规的配方很多,你看看分子克隆好了
如果是细菌或酵母,可能用超声好些,用量和你选择的超声探头的大小等均有关系
可以少量多次,效果较好
5楼2008-03-14 18:13:36
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cauxiaogong

破碎细胞后,做什么了?
也要看你的材料了?
要是测一般的孢内物的含量或是一般的酶活性,可以用超声波,并且原核生物更适宜超声。
要是拿孢内一些小的细胞器:线粒体等,就不适合超声了,可以采用低温机械力破碎。
6楼2008-03-25 16:18:34
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