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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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拓八爷

金虫 (初入文坛)

[求助] 慢病毒感染悬浮细胞并筛选稳转细胞的相关问题,各位大神留步帮帮忙! 已有1人参与

最近要做慢病毒感染悬浮细胞的实验,同时筛选稳转的细胞,puromycin筛选
现在有几个问题很困惑:
1. 我想开始用24孔来筛选,一开始种的细胞密度大概是多少?
2. 感染了病毒48h之后,加入筛选药物,一般培养多久细胞会出现死亡,这中间要更换含有药物的培养液吗?因为是悬浮的细胞,我如何把筛选出的活细胞转移到96孔板种继续培养?我查了相关资料,有的说梯度稀释种到96孔中,每孔1-2个细胞,细胞量这么少,能长得起来吗?
3. 96孔板种培养的时候我还要继续保持原来筛选的puromycin浓度吗?一般96孔中的细胞要长多久才可以长出克隆?
第一次做这个实验,没什么经验,问的比较多,各位路过的大神留步帮帮忙啊!!!不甚感激!
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panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果实验室没有基础而条件有允许,可以考虑将稳转细胞株构建的工作委托给专业的公司做,省时又省钱。
现在有很多专业的生物技术公司可以提供细胞株定制的工作,研发周期也就在4-6周。

如果必须自己做,我建议你多查阅相关文献(慢病毒系统相关,目的基因相关等等),祝好运!
2楼2014-05-04 11:19:43
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拓八爷

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by panda73 at 2014-05-04 11:19:43
如果实验室没有基础而条件有允许,可以考虑将稳转细胞株构建的工作委托给专业的公司做,省时又省钱。
现在有很多专业的生物技术公司可以提供细胞株定制的工作,研发周期也就在4-6周。

如果必须自己做,我建议你 ...

谢谢!
机会只留给有准备的人!
3楼2014-05-04 15:45:13
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