49楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-26 13:24:37
不好意思，最近没怎么上，你把下面柱头打开，给流速冲下来就行，下面可以用烧杯接着...

51楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-27 11:23:16
没事，我感觉你应该最近没上比较忙，呵呵！我那个搞定了，现在的问题就是我有个疑问，就是这个葡聚糖柱子是我的样品先出来，之后是杂质，不过杂质走的比较慢，那你说，我上样一次没上完，那第二次上样我是不是必须 ...

52楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-28 15:45:04
肯定是要第一次都流出来以后才能上第二次的样呀，用0.1MNaOH洗柱子。在柱子里洗，洗完用水洗，再用20%乙醇洗。...

53楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-28 15:58:53
我想请教一下你怎么知道你的杂质都流出来了啊？点板看么？是不是就是最后流出来的是水应该就可以上第2次样了？
还有洗柱子的时候可以用加压泵加压么？我看见有人说不能加压，但是那样流的超级慢啊？...

54楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-28 16:10:39
一般分子筛洗脱一个柱体积就可以了，但是怕有些蛋白会吸附到柱子上，洗完一个柱体积后最好用NaOH洗一次。这个还是要看你样品了，自己把握。你用的什么仪器纯化呀？我用的是GE的AKTA。我不知道你指的加压什么意思？ ...

55楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-28 16:21:07
分子筛洗脱?我也没有用过这个啊？你不说直接用NaOH洗一次不就行了吗？纯化？没有仪器啊？我用的加压的就是类似于给鱼加氧的小泵，不过加上那个泵，感觉流的稍微快点！不过我就怕把填料压坏了！
对了，我的杂质里面 ...

56楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-28 16:32:25
有点无语了！应该补补课了。你这个就叫做分子筛层析，也叫凝胶色谱。不同的柱子和凝胶都有不同的耐压，这个要看测定的压力，你如果没有压力测定的东西直接加泵加压肯定不行。没有的话你就可以上第二次样品了。...

57楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-28 16:43:58
哦，这样啊，关键我确实不太懂这个，我直知道凝胶色谱这个定义，不好意思啊！还有这个压力我也没有仪器啊？怎么测定呢？我以为就像他们过硅胶的柱子，直接加压不是流速就加快了吗，呵呵！...

58楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-28 17:26:45
建议你加个压力表，不然就用重力让他自己流吧...