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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-04 17:48:22
还有您说的这句----再以缓冲溶液(pH7.0的Tris—醋酸溶液)洗涤2—3次,使pH和离子强度达到平衡,最后抽去溶液及凝胶颗粒内部气泡,凝胶可保存在缓冲液内。 那上柱子的时候这个凝胶不就是在缓冲溶液中么?
我是不是 ...

对的,上柱子的时候把缓冲液置换出来。
若嗔若痴,不见风云
11楼2014-05-05 09:59:15
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cy211

木虫 (职业作家)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-05 09:57:34
用乙醇和去离子水的膨胀比不一样的,用乙醇比去离子水的膨胀体积小。应该是1g填料膨胀到2.5-3.5ml。水可以加多点,膨胀完全了,本身就不再吸水了,静止的话会有上清的水出来的。...

您好,那您说这个膨胀体积:2.5-3.5ml/g是加水的时候的膨胀体积是这么大是吧?大概是3倍左右,您说乙醇的膨胀体积比水小,那是不是我就应该多加点乙醇,比如100克填料加入400ML乙醇,这个乙醇和去离子水加多点没什么问题吧?是不是只要我加入的水或者乙醇淹没填料就可以了?
12楼2014-05-05 10:18:08
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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-05 10:18:08
您好,那您说这个膨胀体积:2.5-3.5ml/g是加水的时候的膨胀体积是这么大是吧?大概是3倍左右,您说乙醇的膨胀体积比水小,那是不是我就应该多加点乙醇,比如100克填料加入400ML乙醇,这个乙醇和去离子水加多点没什 ...

再多一些都没有问题,你上柱子的时候膨胀完的填料里面也要加水,要多出三分之一的清水才可以。
若嗔若痴,不见风云
13楼2014-05-05 10:23:51
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cy211

木虫 (职业作家)

引用回帖:
13楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-05 10:23:51
再多一些都没有问题,你上柱子的时候膨胀完的填料里面也要加水,要多出三分之一的清水才可以。...

太感谢你的回复了,还有一个问题就是上样的时候,我查资料说,最好是凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,这个柱床体积是怎么计算的?我以前没过过柱子,不懂!
14楼2014-05-05 10:28:16
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cy211

木虫 (职业作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-05 09:59:15
对的,上柱子的时候把缓冲液置换出来。...

不好意思,我还有一个问题,就是上柱子前需要脱气,这个步骤是怎么操作的啊?
15楼2014-05-05 10:33:37
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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-05 10:28:16
太感谢你的回复了,还有一个问题就是上样的时候,我查资料说,最好是凝胶过滤的上样量一般为5%的柱床体积,我们建议初次上样控制在1-2%的床体积,这个柱床体积是怎么计算的?我以前没过过柱子,不懂!...

你装完柱子后,凝胶的体积。柱子底面积乘以高。
若嗔若痴,不见风云
16楼2014-05-05 10:34:14
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yuyelin

木虫 (正式写手)


cy211(星海慧儿代发): 金币+1, 有帮助,多谢回帖交流。 2014-05-06 08:52:30
引用回帖:
15楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-05 10:33:37
不好意思,我还有一个问题,就是上柱子前需要脱气,这个步骤是怎么操作的啊?...

上柱子用的液体超声脱气,或者泵抽气。
若嗔若痴,不见风云
17楼2014-05-05 10:36:11
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cy211

木虫 (职业作家)

引用回帖:
17楼: Originally posted by yuyelin at 2014-05-05 10:36:11
上柱子用的液体超声脱气,或者泵抽气。...

我就把我的填料和去离子水的悬浮液的烧杯,直接放在超声仪里面,超声脱气就行了吧?大概多长时间,这个有限制么?
18楼2014-05-05 10:48:08
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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-05 10:48:08
我就把我的填料和去离子水的悬浮液的烧杯,直接放在超声仪里面,超声脱气就行了吧?大概多长时间,这个有限制么?...

填料不超声呀,所用的溶液和水要超声
若嗔若痴,不见风云
19楼2014-05-05 11:06:26
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yuyelin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by cy211 at 2014-05-05 10:48:08
我就把我的填料和去离子水的悬浮液的烧杯,直接放在超声仪里面,超声脱气就行了吧?大概多长时间,这个有限制么?...

大概15-20分钟的时间
若嗔若痴,不见风云
20楼2014-05-05 11:06:59
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