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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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laqiwe

兑换贵宾

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[求助] 消失的蛋白 已有1人参与

HiS标签纯化重组蛋白,纯化后分光光度计(Thermo NanoDrop 2000)测蛋白浓度是1mg/ml,跑蛋白考马斯染色结果什么都没有,纯化前的对照有条带,这是什么原因呢?明明测浓度有蛋白,跑胶却什么都没有!!!求解
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yanlili

超级版主

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首要你要做重复试验,很多结果是小错误导致的,如果你的蛋白很多,而纯化后都没了,确实是很奇怪
其次,你有没有把每个吸收峰做电泳?如果是在别的洗脱峰里,那就是说你弄错了峰,如果哪都没有,可能是在哪一步损失掉了。

还有可能紫外吸收是别的东西,不是蛋白质,或者有很多杂质的吸收。你中间有加什么步骤吗?比如浓缩什么的,考染的灵敏度在1ug,如果什么结果都没有,而纯化前有,要不然是浓度太低,要不就是有核酸之类的。测蛋白浓度,bradford法,BCA法都能排除一些物质的干扰。
2楼2014-04-30 15:13:45
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meng_xu

超级版主

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蛋白定量还是用bradford assay比较好
3楼2014-05-02 07:09:25
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