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Carnity

新虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-04 06:17:02
1. 什么基因组?如何提取的DNA,保存方法是什么?保存了多久?
2. 3k的片段,你的pcr条件是什么?
3. 引物的设计,对于gDNA来说,20左右的碱基已经足够了,只要在基因组其他位置没有错配区就没有问题。

呃,问题没那么复杂,模板量,PCR体系、PCR条件的弹性空间都是有的。个人感觉要么就是模板问题,要么就是引物问题。不知道其他条件会不会产生较大影响。
11楼2014-05-05 17:20:31
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meng_xu

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
11楼: Originally posted by Carnity at 2014-05-05 17:20:31
呃,问题没那么复杂,模板量,PCR体系、PCR条件的弹性空间都是有的。个人感觉要么就是模板问题,要么就是引物问题。不知道其他条件会不会产生较大影响。...

当然会有影响,虽然不大,但是还是会,条件还是好好摸摸,比较好
12楼2014-05-06 04:36:30
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朱多龙

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个再正常不过了,你自己也说了之前能扩出来,然后就扩不出来了的。基因组DNA本来就容易断裂之类的,你存的时间久了不知道在那个位置发生了断裂。我放-80的基因组DNA一般也就能用三个月,所以果断重提基因组了。
13楼2014-05-06 10:04:44
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