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wangzhongl

银虫 (小有名气)

[求助] 各位虫友,有没有用DCFH-DA来检测细胞内ROS含量的,来指导下!很急~~不甚感谢!!!

各位虫友,有没有用DCFH-DA来检测细胞内ROS含量的,来指导下!


我现在大概步骤是:
1、先得到细胞悬液控制在10*6数量级(上流式细胞仪检测)
2、加入一种药物(不同浓度)培养12h
3、pbs清洗一次后加入终浓度为200umol/L的 H2O2溶液处理4h
4、pbs清洗一次避光加入终浓度为10umol/L的DCFH-DA孵育0.5h,再用pbs清洗3次
5、上流式细胞仪检测
结果做的不太好,希望指导下?将不甚感谢!
由于我是用鸡血红细胞悬液,不是培养的增殖细胞,就没有用培养基培养。
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insistence
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