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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 保真性太差，200多的片段有6-7个bp的错配
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virologik
11楼2014-04-27 15:08:22
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fanwq258

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么不直接用高保真酶呢？
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
12楼2014-04-27 15:21:46
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zhaodahe

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
怀疑Mix不合适，买个其他的酶自己配体系扩增吧。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2014-04-27 15:49:03
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zep616745243

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
普通Taq酶保真性也没你那么差啊，会不会是模板的问题，有没有多测几个平行组对比下
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只有不断地失败才会成功
14楼2014-04-27 16:19:43
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boyuehu
15楼2014-04-27 16:26:55
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flyxu
16楼2014-04-27 16:41:46
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孙ZONGZI

铁杆木虫 (文坛精英)
祝好
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17楼2014-04-27 16:59:42
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
循环数不要太多，从cDNA或者基因组中扩，最多30个，质粒中扩25个足矣

[ 发自小木虫客户端 ]
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18楼2014-04-27 17:01:53
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ywqxxy
19楼2014-04-27 17:21:15
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cory0931

至尊木虫 (文坛精英)

巫山云
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
木虫论坛上有不少相关话题的；
要高保真，当然是高保真酶好许多，需要在反应结束后加尾巴（用于TA克隆）；
如果是测序或者是别的目的，或者是加了酶切位点的话，只要有足够多的保护碱基，就是另外一回事了；
又或者，直接换mix，好一点的如全式金、promega等（先声明个人不是在打广告）
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锤之千古
20楼2014-04-27 17:40:39
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